生物工程学报
生物工程學報
생물공정학보
CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY
2003年
6期
692-697
,共6页
朱媛娥%徐慧斌%赵志安%钟江
硃媛娥%徐慧斌%趙誌安%鐘江
주원아%서혜빈%조지안%종강
载脂蛋白%高密度脂蛋白%杆状病毒%疏水层析
載脂蛋白%高密度脂蛋白%桿狀病毒%疏水層析
재지단백%고밀도지단백%간상병독%소수층석
载脂蛋白apoA-Ⅰ是高密度脂蛋白中最主要的蛋白,在胆固醇代谢及动脉粥样硬化等疾病的发生和控制中有重要作用.为了建立大量生产和制备该蛋白的方法,昆虫杆状病毒表达系统被用来高效表达了两种形式的人apoA-Ⅰ.不带有信号肽序列的proapoA-Ⅰ蛋白表达后主要在细胞内,但在感染的晚期也有相当量的重组蛋白进入细胞培养液中.用蛇磷脂酶A2抑制因子α亚基信号肽序列引导表达的apoA-Ⅰ蛋白在感染早期可以被分泌到培养液中.在此基础上,通过Phenyl Sepharose疏水柱层析,从感染细胞的培养液中初步分离纯化了成熟的apoA-Ⅰ蛋白.这一结果为apoA-Ⅰ的进一步研究和应用奠定了基础.
載脂蛋白apoA-Ⅰ是高密度脂蛋白中最主要的蛋白,在膽固醇代謝及動脈粥樣硬化等疾病的髮生和控製中有重要作用.為瞭建立大量生產和製備該蛋白的方法,昆蟲桿狀病毒錶達繫統被用來高效錶達瞭兩種形式的人apoA-Ⅰ.不帶有信號肽序列的proapoA-Ⅰ蛋白錶達後主要在細胞內,但在感染的晚期也有相噹量的重組蛋白進入細胞培養液中.用蛇燐脂酶A2抑製因子α亞基信號肽序列引導錶達的apoA-Ⅰ蛋白在感染早期可以被分泌到培養液中.在此基礎上,通過Phenyl Sepharose疏水柱層析,從感染細胞的培養液中初步分離純化瞭成熟的apoA-Ⅰ蛋白.這一結果為apoA-Ⅰ的進一步研究和應用奠定瞭基礎.
재지단백apoA-Ⅰ시고밀도지단백중최주요적단백,재담고순대사급동맥죽양경화등질병적발생화공제중유중요작용.위료건립대량생산화제비해단백적방법,곤충간상병독표체계통피용래고효표체료량충형식적인apoA-Ⅰ.불대유신호태서렬적proapoA-Ⅰ단백표체후주요재세포내,단재감염적만기야유상당량적중조단백진입세포배양액중.용사린지매A2억제인자α아기신호태서렬인도표체적apoA-Ⅰ단백재감염조기가이피분비도배양액중.재차기출상,통과Phenyl Sepharose소수주층석,종감염세포적배양액중초보분리순화료성숙적apoA-Ⅰ단백.저일결과위apoA-Ⅰ적진일보연구화응용전정료기출.
