药学学报
藥學學報
약학학보
ACTA PHARMACEUTICA SINICA
2003年
3期
169-172
,共4页
母生梅%暨荀鹤%马兵%于和鸣%李学军
母生梅%暨荀鶴%馬兵%于和鳴%李學軍
모생매%기순학%마병%우화명%리학군
乙酰唑胺%水孔蛋白%肾脏近曲小管上皮细胞%肽质量指纹谱
乙酰唑胺%水孔蛋白%腎髒近麯小管上皮細胞%肽質量指紋譜
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目的研究乙酰唑胺抑制大鼠肾脏近曲小管上皮细胞水孔蛋白1(aquaporin-1,AQP1)表达的内源性机制.方法将原代培养的大鼠肾脏近曲小管上皮细胞分为两组,一组给予1×10-5 mol*L-1乙酰唑胺,另一组为阴性对照.待细胞长至亚融合状态时裂解细胞,用等电聚焦电泳对裂解物进行差异蛋白筛选,并对差异蛋白作肽质量指纹谱鉴定.结果给乙酰唑胺后细胞中出现两个差异蛋白,其中等电点(pI)为3.8的蛋白给药后的表达减少,数据库检索发现其氨基酸序列与来源于大鼠肝脏和睾丸的刷状缘肌球蛋白有21.4%的相似性;而与来源于大鼠脑的糖原磷酸化酶有27%相似性.另外一条pI为5.5的蛋白被诱导增多,它与来源于大鼠肺脏的α亚型磷脂酰肌醇转移蛋白的相似性为20%.结论乙酰唑胺可能通过影响pI 3.8蛋白或pI 5.5蛋白的表达来抑制AQP1的基因表达.
目的研究乙酰唑胺抑製大鼠腎髒近麯小管上皮細胞水孔蛋白1(aquaporin-1,AQP1)錶達的內源性機製.方法將原代培養的大鼠腎髒近麯小管上皮細胞分為兩組,一組給予1×10-5 mol*L-1乙酰唑胺,另一組為陰性對照.待細胞長至亞融閤狀態時裂解細胞,用等電聚焦電泳對裂解物進行差異蛋白篩選,併對差異蛋白作肽質量指紋譜鑒定.結果給乙酰唑胺後細胞中齣現兩箇差異蛋白,其中等電點(pI)為3.8的蛋白給藥後的錶達減少,數據庫檢索髮現其氨基痠序列與來源于大鼠肝髒和睪汍的刷狀緣肌毬蛋白有21.4%的相似性;而與來源于大鼠腦的糖原燐痠化酶有27%相似性.另外一條pI為5.5的蛋白被誘導增多,它與來源于大鼠肺髒的α亞型燐脂酰肌醇轉移蛋白的相似性為20%.結論乙酰唑胺可能通過影響pI 3.8蛋白或pI 5.5蛋白的錶達來抑製AQP1的基因錶達.
목적연구을선서알억제대서신장근곡소관상피세포수공단백1(aquaporin-1,AQP1)표체적내원성궤제.방법장원대배양적대서신장근곡소관상피세포분위량조,일조급여1×10-5 mol*L-1을선서알,령일조위음성대조.대세포장지아융합상태시렬해세포,용등전취초전영대렬해물진행차이단백사선,병대차이단백작태질량지문보감정.결과급을선서알후세포중출현량개차이단백,기중등전점(pI)위3.8적단백급약후적표체감소,수거고검색발현기안기산서렬여래원우대서간장화고환적쇄상연기구단백유21.4%적상사성;이여래원우대서뇌적당원린산화매유27%상사성.령외일조pI위5.5적단백피유도증다,타여래원우대서폐장적α아형린지선기순전이단백적상사성위20%.결론을선서알가능통과영향pI 3.8단백혹pI 5.5단백적표체래억제AQP1적기인표체.