中国病毒学
中國病毒學
중국병독학
VIROLOGICA SINICA
2001年
3期
265-269
,共5页
鸡传染性喉气管炎病毒%TK基因%套式PCR%检测
鷄傳染性喉氣管炎病毒%TK基因%套式PCR%檢測
계전염성후기관염병독%TK기인%투식PCR%검측
选择鸡传染性喉气管炎病毒保守TK基因的蛋白编码区域,设计并合成了一对外引物和一对内引物,建立并优化了检测鸡传染性喉气管炎病毒DNA的套式PCR法.通过检测ILTV感染的鸡胚绒毛尿囊膜、实验室病料和临床病料,结果表明,套式PCR法能检测出ILTV感染后的非免疫鸡胚和SPF鸡胚绒毛尿囊膜研磨液中的被稀释了105倍的病毒(约1fg的ILTV DNA),攻毒后第10天还能从非免疫鸡和SPF鸡气管拭子中检出ILTV,第10天非免疫鸡气管拭子中ILTV的最大检出率为7/10,第10天SPF鸡气管拭子中ILTV的最大检出率为8/10.对非免疫鸡和SPF鸡的气管拭子中ILTV最佳检出时间均在攻毒后第5天.对临床样品中的ILTV的最大检出率为7/7.经过核酸杂交验证,套式PCR法具有很高的特异性和敏感性,为从分子水平探讨ILTV的发病机理、临床早期快速诊断提供了新的研究手段.
選擇鷄傳染性喉氣管炎病毒保守TK基因的蛋白編碼區域,設計併閤成瞭一對外引物和一對內引物,建立併優化瞭檢測鷄傳染性喉氣管炎病毒DNA的套式PCR法.通過檢測ILTV感染的鷄胚絨毛尿囊膜、實驗室病料和臨床病料,結果錶明,套式PCR法能檢測齣ILTV感染後的非免疫鷄胚和SPF鷄胚絨毛尿囊膜研磨液中的被稀釋瞭105倍的病毒(約1fg的ILTV DNA),攻毒後第10天還能從非免疫鷄和SPF鷄氣管拭子中檢齣ILTV,第10天非免疫鷄氣管拭子中ILTV的最大檢齣率為7/10,第10天SPF鷄氣管拭子中ILTV的最大檢齣率為8/10.對非免疫鷄和SPF鷄的氣管拭子中ILTV最佳檢齣時間均在攻毒後第5天.對臨床樣品中的ILTV的最大檢齣率為7/7.經過覈痠雜交驗證,套式PCR法具有很高的特異性和敏感性,為從分子水平探討ILTV的髮病機理、臨床早期快速診斷提供瞭新的研究手段.
선택계전염성후기관염병독보수TK기인적단백편마구역,설계병합성료일대외인물화일대내인물,건립병우화료검측계전염성후기관염병독DNA적투식PCR법.통과검측ILTV감염적계배융모뇨낭막、실험실병료화림상병료,결과표명,투식PCR법능검측출ILTV감염후적비면역계배화SPF계배융모뇨낭막연마액중적피희석료105배적병독(약1fg적ILTV DNA),공독후제10천환능종비면역계화SPF계기관식자중검출ILTV,제10천비면역계기관식자중ILTV적최대검출솔위7/10,제10천SPF계기관식자중ILTV적최대검출솔위8/10.대비면역계화SPF계적기관식자중ILTV최가검출시간균재공독후제5천.대림상양품중적ILTV적최대검출솔위7/7.경과핵산잡교험증,투식PCR법구유흔고적특이성화민감성,위종분자수평탐토ILTV적발병궤리、림상조기쾌속진단제공료신적연구수단.
