中国科学C辑
中國科學C輯
중국과학C집
SCIENCE IN CHINA (SERIES C)
2001年
1期
59-65
,共7页
恶性疟%杀伤性T细胞%表位重组疫苗%MHCⅠ类分子稳定性
噁性瘧%殺傷性T細胞%錶位重組疫苗%MHCⅠ類分子穩定性
악성학%살상성T세포%표위중조역묘%MHCⅠ류분자은정성
选用中国人群常见的MHCⅠ类分子HLA-A2.1和HLA-B51限制性恶性疟CTL抗原表位, 构建了单表位重组疫苗pcDNA3.1/tr和pcDNA3.1/sh, 再将上述表位DNA序列串联, 构建成双表位重组疫苗pcDNA3.1/ts. 将3种重组疫苗分别转染C1R/HLA-A2.1和K562/HLA-B51细胞后均证实表达. 单表位重组疫苗pcDNA3.1/tr和pcDNA3.1/sh的表达分别促进细胞表面HLA-A2.1和HLA-B51的稳定性. 免疫共沉淀实验证实上述表位促进细胞表面HLAⅠ类分子组装, 并提示特异性表位在细胞表面的递呈. 双表位重组疫苗pcDNA3.1/ts在以上两个不同细胞系中的表达与两个单表位微型基因的表达结果相似, 证明双表位肽的串联编码构型不影响肽链中不同表位的特异性抗原递呈. 这一研究结果为进一步设计具有广泛覆盖率的多表位恶性疟重组CTL疫苗提供了理论和实验基础. 与常规体外CTL实验不同, 本研究观察微表位基因在表达特定MHCⅠ类分子的人细胞中进行内源性抗原递呈的过程, 其方法更接近人体内环境, 对于人类CTL抗原表位的确定和人重组CTL表位疫苗免疫原性的预测具有重要意义.
選用中國人群常見的MHCⅠ類分子HLA-A2.1和HLA-B51限製性噁性瘧CTL抗原錶位, 構建瞭單錶位重組疫苗pcDNA3.1/tr和pcDNA3.1/sh, 再將上述錶位DNA序列串聯, 構建成雙錶位重組疫苗pcDNA3.1/ts. 將3種重組疫苗分彆轉染C1R/HLA-A2.1和K562/HLA-B51細胞後均證實錶達. 單錶位重組疫苗pcDNA3.1/tr和pcDNA3.1/sh的錶達分彆促進細胞錶麵HLA-A2.1和HLA-B51的穩定性. 免疫共沉澱實驗證實上述錶位促進細胞錶麵HLAⅠ類分子組裝, 併提示特異性錶位在細胞錶麵的遞呈. 雙錶位重組疫苗pcDNA3.1/ts在以上兩箇不同細胞繫中的錶達與兩箇單錶位微型基因的錶達結果相似, 證明雙錶位肽的串聯編碼構型不影響肽鏈中不同錶位的特異性抗原遞呈. 這一研究結果為進一步設計具有廣汎覆蓋率的多錶位噁性瘧重組CTL疫苗提供瞭理論和實驗基礎. 與常規體外CTL實驗不同, 本研究觀察微錶位基因在錶達特定MHCⅠ類分子的人細胞中進行內源性抗原遞呈的過程, 其方法更接近人體內環境, 對于人類CTL抗原錶位的確定和人重組CTL錶位疫苗免疫原性的預測具有重要意義.
선용중국인군상견적MHCⅠ류분자HLA-A2.1화HLA-B51한제성악성학CTL항원표위, 구건료단표위중조역묘pcDNA3.1/tr화pcDNA3.1/sh, 재장상술표위DNA서렬천련, 구건성쌍표위중조역묘pcDNA3.1/ts. 장3충중조역묘분별전염C1R/HLA-A2.1화K562/HLA-B51세포후균증실표체. 단표위중조역묘pcDNA3.1/tr화pcDNA3.1/sh적표체분별촉진세포표면HLA-A2.1화HLA-B51적은정성. 면역공침정실험증실상술표위촉진세포표면HLAⅠ류분자조장, 병제시특이성표위재세포표면적체정. 쌍표위중조역묘pcDNA3.1/ts재이상량개불동세포계중적표체여량개단표위미형기인적표체결과상사, 증명쌍표위태적천련편마구형불영향태련중불동표위적특이성항원체정. 저일연구결과위진일보설계구유엄범복개솔적다표위악성학중조CTL역묘제공료이론화실험기출. 여상규체외CTL실험불동, 본연구관찰미표위기인재표체특정MHCⅠ류분자적인세포중진행내원성항원체정적과정, 기방법경접근인체내배경, 대우인류CTL항원표위적학정화인중조CTL표위역묘면역원성적예측구유중요의의.
