中国生物化学与分子生物学报
中國生物化學與分子生物學報
중국생물화학여분자생물학보
CHINESE JOURNAL OF BIOCHEMISTRY AND MOLECULAR BIOLOGY
2000年
1期
10-16
,共7页
锤头状核酶%bcr3/abl2%凋亡
錘頭狀覈酶%bcr3/abl2%凋亡
추두상핵매%bcr3/abl2%조망
利用计算机模拟设计合成了针对K562细胞致癌融合bcr3/abl2 mRNA的锤头状核酶.该核酶以融合点附近UUC为识别切割三联体,在核酶的3′端增加一段T7噬菌体终止子序列.用基因克隆结合体外转录的方法,肯定了核酶的体外切割活性.进而将核酶基因克隆到pCEP4真核细胞高效表达载体上,利用脂质体LipofectinAMINE介导的转染技术将核酶与核酶基因导入靶细胞,从抑制靶细胞K562的增殖与集落形成及引起靶细胞凋亡等方面验证了核酶在细胞水平上对融合基因bcr3/abl2 mRNA的特异切割作用,并观察到了T7噬菌体终止子序列对核酶切割效率的增强影响.
利用計算機模擬設計閤成瞭針對K562細胞緻癌融閤bcr3/abl2 mRNA的錘頭狀覈酶.該覈酶以融閤點附近UUC為識彆切割三聯體,在覈酶的3′耑增加一段T7噬菌體終止子序列.用基因剋隆結閤體外轉錄的方法,肯定瞭覈酶的體外切割活性.進而將覈酶基因剋隆到pCEP4真覈細胞高效錶達載體上,利用脂質體LipofectinAMINE介導的轉染技術將覈酶與覈酶基因導入靶細胞,從抑製靶細胞K562的增殖與集落形成及引起靶細胞凋亡等方麵驗證瞭覈酶在細胞水平上對融閤基因bcr3/abl2 mRNA的特異切割作用,併觀察到瞭T7噬菌體終止子序列對覈酶切割效率的增彊影響.
이용계산궤모의설계합성료침대K562세포치암융합bcr3/abl2 mRNA적추두상핵매.해핵매이융합점부근UUC위식별절할삼련체,재핵매적3′단증가일단T7서균체종지자서렬.용기인극륭결합체외전록적방법,긍정료핵매적체외절할활성.진이장핵매기인극륭도pCEP4진핵세포고효표체재체상,이용지질체LipofectinAMINE개도적전염기술장핵매여핵매기인도입파세포,종억제파세포K562적증식여집락형성급인기파세포조망등방면험증료핵매재세포수평상대융합기인bcr3/abl2 mRNA적특이절할작용,병관찰도료T7서균체종지자서렬대핵매절할효솔적증강영향.
