农业生物技术学报
農業生物技術學報
농업생물기술학보
JOURNAL OF AGRICULTURAL BIOTECHNOLOGY
2000年
4期
392-395
,共4页
周云%林爱星%刘建喜%冯继东%严阿勇%侯健%陈永福
週雲%林愛星%劉建喜%馮繼東%嚴阿勇%侯健%陳永福
주운%림애성%류건희%풍계동%엄아용%후건%진영복
真核表达载体%染色质位置效应%基质附着区序列(MAR)%绿色荧光蛋白GFP%-乳球蛋白(BLG)基因
真覈錶達載體%染色質位置效應%基質附著區序列(MAR)%綠色熒光蛋白GFP%-乳毬蛋白(BLG)基因
진핵표체재체%염색질위치효응%기질부착구서렬(MAR)%록색형광단백GFP%-유구단백(BLG)기인
为了实现外源蛋白质在动物乳腺中特异性表达,采用PCR法扩增了BLG 3'端含第6,7外显子及poly(A)加尾信号下游约200 bp的0.87 kb片断.以山羊BLG 5'的3.2 kb(含第1,2外显子)启动子,山羊BLG 3' 0.87 kb序列,鸡 -珠蛋白基因簇基因上游的 2.4~ 5.3 kb HindⅢ序列,绿色荧光蛋白GFP及原核载体pGEM-7zf构建了pGEM-7zf-GFP-MAR-5' BLG-3' BLG的乳腺特异性表达载体,将外源基因插入BLG 5'端EcoRⅠ位点,或许可能实现其在乳腺中位置独立性表达.
為瞭實現外源蛋白質在動物乳腺中特異性錶達,採用PCR法擴增瞭BLG 3'耑含第6,7外顯子及poly(A)加尾信號下遊約200 bp的0.87 kb片斷.以山羊BLG 5'的3.2 kb(含第1,2外顯子)啟動子,山羊BLG 3' 0.87 kb序列,鷄 -珠蛋白基因簇基因上遊的 2.4~ 5.3 kb HindⅢ序列,綠色熒光蛋白GFP及原覈載體pGEM-7zf構建瞭pGEM-7zf-GFP-MAR-5' BLG-3' BLG的乳腺特異性錶達載體,將外源基因插入BLG 5'耑EcoRⅠ位點,或許可能實現其在乳腺中位置獨立性錶達.
위료실현외원단백질재동물유선중특이성표체,채용PCR법확증료BLG 3'단함제6,7외현자급poly(A)가미신호하유약200 bp적0.87 kb편단.이산양BLG 5'적3.2 kb(함제1,2외현자)계동자,산양BLG 3' 0.87 kb서렬,계 -주단백기인족기인상유적 2.4~ 5.3 kb HindⅢ서렬,록색형광단백GFP급원핵재체pGEM-7zf구건료pGEM-7zf-GFP-MAR-5' BLG-3' BLG적유선특이성표체재체,장외원기인삽입BLG 5'단EcoRⅠ위점,혹허가능실현기재유선중위치독립성표체.
