中国病毒学
中國病毒學
중국병독학
VIROLOGICA SINICA
1999年
2期
147-151
,共5页
宁德刚%刘海燕%雷时美%覃巍巍%项恩鸿%李天宪
寧德剛%劉海燕%雷時美%覃巍巍%項恩鴻%李天憲
저덕강%류해연%뢰시미%담외외%항은홍%리천헌
庚型肝炎病毒%逆转录-聚合酶链反应%荧光素标记基因探针%分子杂交
庚型肝炎病毒%逆轉錄-聚閤酶鏈反應%熒光素標記基因探針%分子雜交
경형간염병독%역전록-취합매련반응%형광소표기기인탐침%분자잡교
参考国内外已完成测序的庚型肝炎病毒(GBV-C/HGV)基因序列,选取毒株间系列较保守的基因片段,并合成与之互补的核苷酸序列(Antisense),用末端转移酶将荧光素-N6-dd ATP标记该片段,制成庚肝病毒基因探针.在严格控制温度的条件下,与固定于硝酸纤维膜(NC膜)上血清斑点杂交,洗膜后与抗-荧光素-碱性磷酸酶(AP)结合,加底物后化学发光自显影判断结果.该方法检测与套式逆转录-聚合酶链反应(Nested RT-PCR)检测结果的阳性符合率为88.2%,阴性符合率为100%;并且与其他相关病毒基因无交叉反应,具有较好的特异性与灵敏性.其检测结果比EIA法检测庚肝病毒抗体更具临床意义.
參攷國內外已完成測序的庚型肝炎病毒(GBV-C/HGV)基因序列,選取毒株間繫列較保守的基因片段,併閤成與之互補的覈苷痠序列(Antisense),用末耑轉移酶將熒光素-N6-dd ATP標記該片段,製成庚肝病毒基因探針.在嚴格控製溫度的條件下,與固定于硝痠纖維膜(NC膜)上血清斑點雜交,洗膜後與抗-熒光素-堿性燐痠酶(AP)結閤,加底物後化學髮光自顯影判斷結果.該方法檢測與套式逆轉錄-聚閤酶鏈反應(Nested RT-PCR)檢測結果的暘性符閤率為88.2%,陰性符閤率為100%;併且與其他相關病毒基因無交扠反應,具有較好的特異性與靈敏性.其檢測結果比EIA法檢測庚肝病毒抗體更具臨床意義.
삼고국내외이완성측서적경형간염병독(GBV-C/HGV)기인서렬,선취독주간계렬교보수적기인편단,병합성여지호보적핵감산서렬(Antisense),용말단전이매장형광소-N6-dd ATP표기해편단,제성경간병독기인탐침.재엄격공제온도적조건하,여고정우초산섬유막(NC막)상혈청반점잡교,세막후여항-형광소-감성린산매(AP)결합,가저물후화학발광자현영판단결과.해방법검측여투식역전록-취합매련반응(Nested RT-PCR)검측결과적양성부합솔위88.2%,음성부합솔위100%;병차여기타상관병독기인무교차반응,구유교호적특이성여령민성.기검측결과비EIA법검측경간병독항체경구림상의의.
