第一军医大学学报
第一軍醫大學學報
제일군의대학학보
JOURNAL OF FIRST MILITARY MEDICAL UNIVERSITY
2000年
4期
319-321
,共3页
王省良%周东耀%王丽之%万成松%曾位森%彭华国%王虹
王省良%週東耀%王麗之%萬成鬆%曾位森%彭華國%王虹
왕성량%주동요%왕려지%만성송%증위삼%팽화국%왕홍
尿嘧啶%脱氧核糖核酸酶类%糖苷水解酶类%聚合酶链反应%抗污染%核酸杂交
尿嘧啶%脫氧覈糖覈痠酶類%糖苷水解酶類%聚閤酶鏈反應%抗汙染%覈痠雜交
뇨밀정%탈양핵당핵산매류%당감수해매류%취합매련반응%항오염%핵산잡교
目的采用PCR微板核酸杂交ELISA技术分析尿嘧啶DNA糖苷酶(UNG/UDG)防止PCR产物污染及其对PCR扩增效率的影响,探讨在不同A/T含量的微生物中含尿嘧啶的PCR产物对核酸杂交的影响.方法以3组dUTP含量不同的PCR产物作模板,抗污染组用UNG处理,直接进行再次扩增.用微板核酸杂交ELISA检测第二次PCR扩增的结果. 结果抗污染组中以含dUTP的PCR产物作模板,结果为阴性;而以不含dUTP的PCR产物作模板,结果为阳性.非抗污染组全部为阳性.对3组PCR产物再进行核酸杂交无明显差别,且在一定温度内,3组具有同样的稳定性. 结论 UNG能有效降解含dUTP的PCR产物,使之不能作为模板再次扩增,可以有效地防止PCR产物的污染.含有尿嘧啶的PCR产物对寡核苷酸探针的杂交无影响.
目的採用PCR微闆覈痠雜交ELISA技術分析尿嘧啶DNA糖苷酶(UNG/UDG)防止PCR產物汙染及其對PCR擴增效率的影響,探討在不同A/T含量的微生物中含尿嘧啶的PCR產物對覈痠雜交的影響.方法以3組dUTP含量不同的PCR產物作模闆,抗汙染組用UNG處理,直接進行再次擴增.用微闆覈痠雜交ELISA檢測第二次PCR擴增的結果. 結果抗汙染組中以含dUTP的PCR產物作模闆,結果為陰性;而以不含dUTP的PCR產物作模闆,結果為暘性.非抗汙染組全部為暘性.對3組PCR產物再進行覈痠雜交無明顯差彆,且在一定溫度內,3組具有同樣的穩定性. 結論 UNG能有效降解含dUTP的PCR產物,使之不能作為模闆再次擴增,可以有效地防止PCR產物的汙染.含有尿嘧啶的PCR產物對寡覈苷痠探針的雜交無影響.
목적채용PCR미판핵산잡교ELISA기술분석뇨밀정DNA당감매(UNG/UDG)방지PCR산물오염급기대PCR확증효솔적영향,탐토재불동A/T함량적미생물중함뇨밀정적PCR산물대핵산잡교적영향.방법이3조dUTP함량불동적PCR산물작모판,항오염조용UNG처리,직접진행재차확증.용미판핵산잡교ELISA검측제이차PCR확증적결과. 결과항오염조중이함dUTP적PCR산물작모판,결과위음성;이이불함dUTP적PCR산물작모판,결과위양성.비항오염조전부위양성.대3조PCR산물재진행핵산잡교무명현차별,차재일정온도내,3조구유동양적은정성. 결론 UNG능유효강해함dUTP적PCR산물,사지불능작위모판재차확증,가이유효지방지PCR산물적오염.함유뇨밀정적PCR산물대과핵감산탐침적잡교무영향.
