分析化学
分析化學
분석화학
CHINESE JOURNAL OF ANALYTICAL CHEMISTRY
2003年
1期
34-37
,共4页
翟俊辉%黄惠杰%杨瑞馥%任冰强%赵永凯
翟俊輝%黃惠傑%楊瑞馥%任冰彊%趙永凱
적준휘%황혜걸%양서복%임빙강%조영개
光纤%生物传感器%核酸%特异性检测
光纖%生物傳感器%覈痠%特異性檢測
광섬%생물전감기%핵산%특이성검측
为了利用光纤传感器实现对细菌核酸分子的特异性和相对快速检测,我们使用直径1 mm的石英光纤和635 nm激光二极管,利用倏逝波原理制作了光纤生物传感器.光纤经过处理后产生醛基化基团,然后与核酸分子进行共价结合.通过3个实验来验证传感器的特异性和灵敏度.荧光素溶液直接检测,使用互补模式寡核苷酸分子(25 mer)进行核酸杂交模式实验和设计嗜肺军团菌一段特异性探针与荧光标记嗜肺军团菌染色体DNA杂交.结果表明:光纤检测荧光素的灵敏度可达0.01 nmol/L,而生物芯片扫描仪最低可检测到1 nmol/L的荧光素;模式寡核苷酸杂交表明:光纤传感器可以特异性地检出目的核酸分子,灵敏度可达纳克级水平;染色体杂交结果显示在正常检测浓度下,光纤检测军团菌之信噪比达到了6∶1,同时具有较好的特异性.检测时间约需要3~4 h.我们构建的光纤生物传感器可以用于核酸分子的特异性检测,并且具有较好的灵敏度,对光纤表面修饰、样品处理和杂交过程的优化可望使之应用于实际标本的检测.
為瞭利用光纖傳感器實現對細菌覈痠分子的特異性和相對快速檢測,我們使用直徑1 mm的石英光纖和635 nm激光二極管,利用倏逝波原理製作瞭光纖生物傳感器.光纖經過處理後產生醛基化基糰,然後與覈痠分子進行共價結閤.通過3箇實驗來驗證傳感器的特異性和靈敏度.熒光素溶液直接檢測,使用互補模式寡覈苷痠分子(25 mer)進行覈痠雜交模式實驗和設計嗜肺軍糰菌一段特異性探針與熒光標記嗜肺軍糰菌染色體DNA雜交.結果錶明:光纖檢測熒光素的靈敏度可達0.01 nmol/L,而生物芯片掃描儀最低可檢測到1 nmol/L的熒光素;模式寡覈苷痠雜交錶明:光纖傳感器可以特異性地檢齣目的覈痠分子,靈敏度可達納剋級水平;染色體雜交結果顯示在正常檢測濃度下,光纖檢測軍糰菌之信譟比達到瞭6∶1,同時具有較好的特異性.檢測時間約需要3~4 h.我們構建的光纖生物傳感器可以用于覈痠分子的特異性檢測,併且具有較好的靈敏度,對光纖錶麵脩飾、樣品處理和雜交過程的優化可望使之應用于實際標本的檢測.
위료이용광섬전감기실현대세균핵산분자적특이성화상대쾌속검측,아문사용직경1 mm적석영광섬화635 nm격광이겁관,이용숙서파원리제작료광섬생물전감기.광섬경과처리후산생철기화기단,연후여핵산분자진행공개결합.통과3개실험래험증전감기적특이성화령민도.형광소용액직접검측,사용호보모식과핵감산분자(25 mer)진행핵산잡교모식실험화설계기폐군단균일단특이성탐침여형광표기기폐군단균염색체DNA잡교.결과표명:광섬검측형광소적령민도가체0.01 nmol/L,이생물심편소묘의최저가검측도1 nmol/L적형광소;모식과핵감산잡교표명:광섬전감기가이특이성지검출목적핵산분자,령민도가체납극급수평;염색체잡교결과현시재정상검측농도하,광섬검측군단균지신조비체도료6∶1,동시구유교호적특이성.검측시간약수요3~4 h.아문구건적광섬생물전감기가이용우핵산분자적특이성검측,병차구유교호적령민도,대광섬표면수식、양품처리화잡교과정적우화가망사지응용우실제표본적검측.