CAJ | 학술논문

扩展青霉(Penicillium expansum)PF898可产生一种具有重要工业生产价值的碱性脂肪酶(PEL).在通过3′RACE和5′RACE获得PEL完整的cDNA 序列的基础上,通过PCR方法首次克隆了该脂肪酶的完整的基因组DNA序列(GenBank登录号为AF330635).该脂肪酶DNA全长1 404 bp,包括PEL编码区、3′非翻译区和部分5′非翻译区基因的序列.编码区DNA由1 135个碱基组成,含有5个内含子,大小分别为58 bp、47 bp、50 bp、56 bp和69 bp.在已报道的丝状真菌脂肪酶中,PEL基因的内含子数量最多,而其大小与其它丝状真菌脂肪酶基因的内含子一样,均为只有几十个碱基的小内含子.PCR扩增获得的PLE DNA序列还包括由195个碱基组成的3′端非编码区序列,74个碱基的部分5′端非编码区序列.PEL DNA全长序列中的-24至-27 nt为TATA box,终止码TGA下游156 nt出现AATAAA序列,TGA下游182位出现poly(A)尾,为典型的真核基因结构.同源性序列分析表明,PEL与其它真菌来源脂肪酶的基因组DNA序列同源性约为39%～49%,PEL内含子之间或PEL内含子与其它丝状真菌脂肪酶基因的内含子之间的序列同源性约42%～57%.
확전청매(Penicillium expansum)PF898가산생일충구유중요공업생산개치적감성지방매(PEL).재통과3′RACE화5′RACE획득PEL완정적cDNA 서렬적기출상,통과PCR방법수차극륭료해지방매적완정적기인조DNA서렬(GenBank등록호위AF330635).해지방매DNA전장1 404 bp,포괄PEL편마구、3′비번역구화부분5′비번역구기인적서렬.편마구DNA유1 135개감기조성,함유5개내함자,대소분별위58 bp、47 bp、50 bp、56 bp화69 bp.재이보도적사상진균지방매중,PEL기인적내함자수량최다,이기대소여기타사상진균지방매기인적내함자일양,균위지유궤십개감기적소내함자.PCR확증획득적PLE DNA서렬환포괄유195개감기조성적3′단비편마구서렬,74개감기적부분5′단비편마구서렬.PEL DNA전장서렬중적-24지-27 nt위TATA box,종지마TGA하유156 nt출현AATAAA서렬,TGA하유182위출현poly(A)미,위전형적진핵기인결구.동원성서렬분석표명,PEL여기타진균래원지방매적기인조DNA서렬동원성약위39%～49%,PEL내함자지간혹PEL내함자여기타사상진균지방매기인적내함자지간적서렬동원성약42%～57%.