中国药理学通报
中國藥理學通報
중국약이학통보
CHINESE PHARMACOLOGICAL BULLETIN
2002年
2期
178-182
,共5页
杨晓茹%关永源%丘钦英%贺华%李劲梁
楊曉茹%關永源%丘欽英%賀華%李勁樑
양효여%관영원%구흠영%하화%리경량
α1B-AR%受体操纵性Ca2+通道%Trp%酪氨酸激酶%genistein
α1B-AR%受體操縱性Ca2+通道%Trp%酪氨痠激酶%genistein
α1B-AR%수체조종성Ca2+통도%Trp%락안산격매%genistein
目的探讨Trp3(transient receptor potential 3)蛋白是否参与α1B-AR引起的Ca2+内流以及酪氨酸激酶对其调控作用.方法采用脂质体转染,将hTrp3 cDNA分别转染到HEK293细胞和已有α1B受体稳定表达的HEK293细胞;Western blot方法检测Trp3蛋白表达情况;Fura-2/AM荧光分光光度法,测定胞浆游离Ca2+浓度.结果 HEK293细胞上可检测到hTrp3的内源性表达,转染后其表达增加.α1B-HEK293细胞转染hTrp3 cDNA后, α1B-AR引起的Ca2+内流显著增加(P<0.01);转染hTrp3 cDNA对thapsigargin诱导的Ca2+内流无作用.5～30 μmolL-1 genistein 对转染细胞α1B-AR诱发的Ca2+内流有抑制作用,最大抑制率达(75.2±12.6)%.结论 Trp3 cDNA转染可能主要通过非CRAC(calcium release activated calcium)途径增加α1B-AR引起的Ca2+内流,这一过程很大程度上依赖酪氨酸激酶的调控.
目的探討Trp3(transient receptor potential 3)蛋白是否參與α1B-AR引起的Ca2+內流以及酪氨痠激酶對其調控作用.方法採用脂質體轉染,將hTrp3 cDNA分彆轉染到HEK293細胞和已有α1B受體穩定錶達的HEK293細胞;Western blot方法檢測Trp3蛋白錶達情況;Fura-2/AM熒光分光光度法,測定胞漿遊離Ca2+濃度.結果 HEK293細胞上可檢測到hTrp3的內源性錶達,轉染後其錶達增加.α1B-HEK293細胞轉染hTrp3 cDNA後, α1B-AR引起的Ca2+內流顯著增加(P<0.01);轉染hTrp3 cDNA對thapsigargin誘導的Ca2+內流無作用.5～30 μmolL-1 genistein 對轉染細胞α1B-AR誘髮的Ca2+內流有抑製作用,最大抑製率達(75.2±12.6)%.結論 Trp3 cDNA轉染可能主要通過非CRAC(calcium release activated calcium)途徑增加α1B-AR引起的Ca2+內流,這一過程很大程度上依賴酪氨痠激酶的調控.
목적탐토Trp3(transient receptor potential 3)단백시부삼여α1B-AR인기적Ca2+내류이급락안산격매대기조공작용.방법채용지질체전염,장hTrp3 cDNA분별전염도HEK293세포화이유α1B수체은정표체적HEK293세포;Western blot방법검측Trp3단백표체정황;Fura-2/AM형광분광광도법,측정포장유리Ca2+농도.결과 HEK293세포상가검측도hTrp3적내원성표체,전염후기표체증가.α1B-HEK293세포전염hTrp3 cDNA후, α1B-AR인기적Ca2+내류현저증가(P<0.01);전염hTrp3 cDNA대thapsigargin유도적Ca2+내류무작용.5～30 μmolL-1 genistein 대전염세포α1B-AR유발적Ca2+내류유억제작용,최대억제솔체(75.2±12.6)%.결론 Trp3 cDNA전염가능주요통과비CRAC(calcium release activated calcium)도경증가α1B-AR인기적Ca2+내류,저일과정흔대정도상의뢰락안산격매적조공.
