中国妇产科临床杂志
中國婦產科臨床雜誌
중국부산과림상잡지
CHINESE JOURNAL OF CLINICAL OBSTETRICS AND GYNECOLOGY
2002年
1期
44-47
,共4页
崔恒%昌晓红%冯捷%刘蓓%曹善津%李小平%钱和年
崔恆%昌曉紅%馮捷%劉蓓%曹善津%李小平%錢和年
최항%창효홍%풍첩%류배%조선진%리소평%전화년
抗独特型抗体%人源化%人IgG1%卵巢肿瘤%融合蛋白
抗獨特型抗體%人源化%人IgG1%卵巢腫瘤%融閤蛋白
항독특형항체%인원화%인IgG1%란소종류%융합단백
目的对模拟人卵巢癌抗原的鼠源性抗独特型单链抗体6B11scFv进行人源化改造和表达.方法采用重叠PCR和基因工程技术,将6B11scFv基因与人IgG1铰链区和CH3区的基因进行融合,构建人源化抗独特型抗体6B11VHVLhC基因.用IPTG诱导大肠杆菌进行表达,并采用酶切法、DNA测序、SDS-PAGE电泳、ELISA和免疫印迹技术等进行鉴定.结果酶切和DNA测序表明插入片段正确;SDS-PAGE凝胶电泳显示融合蛋白分子量50 000 Da处有一诱导蛋白带;而不连续非变性凝胶电泳表达产物分子量为100000 Da;ELISA和免疫印迹结果显示,表达出的6B11VHVLhC人源化抗体仍具有6B11scFv和人IgG1CH3的活性.结论已成功构建并表达出双价的可模拟卵巢癌抗原的人源化抗独特型抗体.
目的對模擬人卵巢癌抗原的鼠源性抗獨特型單鏈抗體6B11scFv進行人源化改造和錶達.方法採用重疊PCR和基因工程技術,將6B11scFv基因與人IgG1鉸鏈區和CH3區的基因進行融閤,構建人源化抗獨特型抗體6B11VHVLhC基因.用IPTG誘導大腸桿菌進行錶達,併採用酶切法、DNA測序、SDS-PAGE電泳、ELISA和免疫印跡技術等進行鑒定.結果酶切和DNA測序錶明插入片段正確;SDS-PAGE凝膠電泳顯示融閤蛋白分子量50 000 Da處有一誘導蛋白帶;而不連續非變性凝膠電泳錶達產物分子量為100000 Da;ELISA和免疫印跡結果顯示,錶達齣的6B11VHVLhC人源化抗體仍具有6B11scFv和人IgG1CH3的活性.結論已成功構建併錶達齣雙價的可模擬卵巢癌抗原的人源化抗獨特型抗體.
목적대모의인란소암항원적서원성항독특형단련항체6B11scFv진행인원화개조화표체.방법채용중첩PCR화기인공정기술,장6B11scFv기인여인IgG1교련구화CH3구적기인진행융합,구건인원화항독특형항체6B11VHVLhC기인.용IPTG유도대장간균진행표체,병채용매절법、DNA측서、SDS-PAGE전영、ELISA화면역인적기술등진행감정.결과매절화DNA측서표명삽입편단정학;SDS-PAGE응효전영현시융합단백분자량50 000 Da처유일유도단백대;이불련속비변성응효전영표체산물분자량위100000 Da;ELISA화면역인적결과현시,표체출적6B11VHVLhC인원화항체잉구유6B11scFv화인IgG1CH3적활성.결론이성공구건병표체출쌍개적가모의란소암항원적인원화항독특형항체.
