CAJ | 학술논문

目的：克隆染色体 7q31 32区域 D7S495附近鼻咽癌相关的候选抑瘤基因，并研究其在鼻咽癌发生发展中的作用。方法：应用定位－候选克隆策略结合生物信息学手段筛选鼻咽癌负相关的 EST(Expressed Sequence Tags)， cDNA克隆测序和 5′ RACE扩增获取候选 EST的 cDNA序列。 Northern杂交和 RT PCR检测其组织表达谱及其在正常人胚鼻咽上皮与鼻咽癌细胞株和活检组织中的表达差异。 Southern杂交和甲基化分析表达差异的机制。结果：克隆到一个位于 7q31 32的与鼻咽癌负相关的新基因 (GenBank登录号： AF196976，命名为 NAG 14)，该基因编码 649AA，含有 LRR和 IgC2结构域。 Multiple Tissue Northern(MTNTM) Blot杂交结果显示该基因在脑组织中表达较强，而在心、肝、肾、肺、脾、骨骼肌和胎盘等多种组织中检测不到表达。 RT PCR检测发现其在鼻咽癌细胞株和 75％活检组织表达缺失或下调， Southern 和甲基化分析表明其在鼻咽癌细胞株中某些位点发生甲基化修饰，鼻咽癌活检组织中存在遗传物质丢失。结论： NAG14可能是定位于 7q31 32的一个与鼻咽癌相关的抑瘤基因候选者。
목적：극륭염색체 7q31 32구역 D7S495부근비인암상관적후선억류기인，병연구기재비인암발생발전중적작용。방법：응용정위－후선극륭책략결합생물신식학수단사선비인암부상관적 EST(Expressed Sequence Tags)， cDNA극륭측서화 5′ RACE확증획취후선 EST적 cDNA서렬。 Northern잡교화 RT PCR검측기조직표체보급기재정상인배비인상피여비인암세포주화활검조직중적표체차이。 Southern잡교화갑기화분석표체차이적궤제。결과：극륭도일개위우 7q31 32적여비인암부상관적신기인 (GenBank등록호： AF196976，명명위 NAG 14)，해기인편마 649AA，함유 LRR화 IgC2결구역。 Multiple Tissue Northern(MTNTM) Blot잡교결과현시해기인재뇌조직중표체교강，이재심、간、신、폐、비、골격기화태반등다충조직중검측불도표체。 RT PCR검측발현기재비인암세포주화 75％활검조직표체결실혹하조， Southern 화갑기화분석표명기재비인암세포주중모사위점발생갑기화수식，비인암활검조직중존재유전물질주실。결론： NAG14가능시정위우 7q31 32적일개여비인암상관적억류기인후선자。