中国肿瘤生物治疗杂志
中國腫瘤生物治療雜誌
중국종류생물치료잡지
CHINESE JOURNAL OF CANCER BIOTHERAPY
2002年
4期
257-260
,共4页
岳玉环%朱平%朱冬冬%张国利%李树民%李铁征
嶽玉環%硃平%硃鼕鼕%張國利%李樹民%李鐵徵
악옥배%주평%주동동%장국리%리수민%리철정
表皮生长因子%血管生成素%融合蛋白%细胞毒性
錶皮生長因子%血管生成素%融閤蛋白%細胞毒性
표피생장인자%혈관생성소%융합단백%세포독성
目的:构建由人表皮生长因子(epidermal growthfactor,EGF)和人血管生成素(angiogenin,Ang)组成的人源化的融合蛋白,并检测其对肿瘤细胞的靶向杀伤能力.方法:利用基因工程技术将EGF和Ang基因连接起来,克隆到高效表达载体pET28a(+)中,构建重组表达质粒pEGF-Ang,并在大肠杆菌中表达该融合蛋白(EGF-Ang).经DEAE-Sepharose FF阴离子交换柱层析纯化后,用MTT法检测复性蛋白的细胞毒性.结果:SDS-PAGE和薄层扫描分析表明外源蛋白的表达量占菌体裂解蛋白总量的18.6%.细胞活性检测表明EGF-Ang重组蛋白能明显地抑制Hep2细胞的生长,而不影响MA104细胞的正常生长.结论:融合蛋白EGF-Ang在体外对过度表达EGFR的Hep2细胞具有明显的杀伤作用.
目的:構建由人錶皮生長因子(epidermal growthfactor,EGF)和人血管生成素(angiogenin,Ang)組成的人源化的融閤蛋白,併檢測其對腫瘤細胞的靶嚮殺傷能力.方法:利用基因工程技術將EGF和Ang基因連接起來,剋隆到高效錶達載體pET28a(+)中,構建重組錶達質粒pEGF-Ang,併在大腸桿菌中錶達該融閤蛋白(EGF-Ang).經DEAE-Sepharose FF陰離子交換柱層析純化後,用MTT法檢測複性蛋白的細胞毒性.結果:SDS-PAGE和薄層掃描分析錶明外源蛋白的錶達量佔菌體裂解蛋白總量的18.6%.細胞活性檢測錶明EGF-Ang重組蛋白能明顯地抑製Hep2細胞的生長,而不影響MA104細胞的正常生長.結論:融閤蛋白EGF-Ang在體外對過度錶達EGFR的Hep2細胞具有明顯的殺傷作用.
목적:구건유인표피생장인자(epidermal growthfactor,EGF)화인혈관생성소(angiogenin,Ang)조성적인원화적융합단백,병검측기대종류세포적파향살상능력.방법:이용기인공정기술장EGF화Ang기인련접기래,극륭도고효표체재체pET28a(+)중,구건중조표체질립pEGF-Ang,병재대장간균중표체해융합단백(EGF-Ang).경DEAE-Sepharose FF음리자교환주층석순화후,용MTT법검측복성단백적세포독성.결과:SDS-PAGE화박층소묘분석표명외원단백적표체량점균체렬해단백총량적18.6%.세포활성검측표명EGF-Ang중조단백능명현지억제Hep2세포적생장,이불영향MA104세포적정상생장.결론:융합단백EGF-Ang재체외대과도표체EGFR적Hep2세포구유명현적살상작용.
