药物生物技术
藥物生物技術
약물생물기술
PHARMACEUTICAL BIOTECHNOLOGY
2004年
1期
7-10
,共4页
瞿小婷%赵华军%奚涛%侯永泰
瞿小婷%趙華軍%奚濤%侯永泰
구소정%조화군%해도%후영태
乙酰肝素酶%肿瘤转移%基因重组
乙酰肝素酶%腫瘤轉移%基因重組
을선간소매%종류전이%기인중조
构建了人乙酰肝素酶基因系列真核表达载体,并在NIH3T3细胞中表达,以研究乙酰肝素酶的结构与功能的关系.采用PCR及Gene SOE的方法从人乙酰肝素酶cDNA中扩增得到hpaFL(Met1-Ile543),hpa109(Met1-Glu109)及hpasp50(pro,Met1-Ala35+Lys158-Ile543),然后插入真核表达载体pcDNA 3.1中.采用脂质体介导法将其转染NIH3T3细胞,48h后RT-PCR检测转染细胞中外源乙酰肝素酶基因的转录.结果:酶切鉴定、测序结果以及RT-PCR分析结果表明成功构建了重组表达载体pcDNA-hpaFL,pcDNA-hpa109及pcD-NA-hpasp50,并在NIH3T3细胞中有效转录.构建成功的乙酰肝素酶系列表达载体可为乙酰肝素酶结构与功能关系的研究奠定基础.
構建瞭人乙酰肝素酶基因繫列真覈錶達載體,併在NIH3T3細胞中錶達,以研究乙酰肝素酶的結構與功能的關繫.採用PCR及Gene SOE的方法從人乙酰肝素酶cDNA中擴增得到hpaFL(Met1-Ile543),hpa109(Met1-Glu109)及hpasp50(pro,Met1-Ala35+Lys158-Ile543),然後插入真覈錶達載體pcDNA 3.1中.採用脂質體介導法將其轉染NIH3T3細胞,48h後RT-PCR檢測轉染細胞中外源乙酰肝素酶基因的轉錄.結果:酶切鑒定、測序結果以及RT-PCR分析結果錶明成功構建瞭重組錶達載體pcDNA-hpaFL,pcDNA-hpa109及pcD-NA-hpasp50,併在NIH3T3細胞中有效轉錄.構建成功的乙酰肝素酶繫列錶達載體可為乙酰肝素酶結構與功能關繫的研究奠定基礎.
구건료인을선간소매기인계렬진핵표체재체,병재NIH3T3세포중표체,이연구을선간소매적결구여공능적관계.채용PCR급Gene SOE적방법종인을선간소매cDNA중확증득도hpaFL(Met1-Ile543),hpa109(Met1-Glu109)급hpasp50(pro,Met1-Ala35+Lys158-Ile543),연후삽입진핵표체재체pcDNA 3.1중.채용지질체개도법장기전염NIH3T3세포,48h후RT-PCR검측전염세포중외원을선간소매기인적전록.결과:매절감정、측서결과이급RT-PCR분석결과표명성공구건료중조표체재체pcDNA-hpaFL,pcDNA-hpa109급pcD-NA-hpasp50,병재NIH3T3세포중유효전록.구건성공적을선간소매계렬표체재체가위을선간소매결구여공능관계적연구전정기출.
