昆虫学报
昆蟲學報
곤충학보
ACTA ENTOMOLOGICA SINICA
2005年
2期
172-178
,共7页
汤方%张常忠%梁沛%史雪岩%高希武
湯方%張常忠%樑沛%史雪巖%高希武
탕방%장상충%량패%사설암%고희무
棉铃虫%谷胱甘肽S-转移酶%硫酸铵沉淀%聚乙烯亚胺沉淀%聚乙二醇沉淀%GSH-Sepharose 4B亲和柱
棉鈴蟲%穀胱甘肽S-轉移酶%硫痠銨沉澱%聚乙烯亞胺沉澱%聚乙二醇沉澱%GSH-Sepharose 4B親和柱
면령충%곡광감태S-전이매%류산안침정%취을희아알침정%취을이순침정%GSH-Sepharose 4B친화주
通过用聚乙烯亚胺(PEI)、硫酸铵、聚乙二醇(PEG)沉淀技术和GSH-Sepharose 4B亲和柱对棉铃虫Helicoverpa armigera(Hübner)幼虫中谷胱甘肽S-转移酶进行了部分纯化研究.结果表明PEG10000和PEG20000的纯化效果优于硫酸铵的沉淀效果.通过PEI沉淀去核酸后,再用硫酸铵沉淀,中肠和脂肪体GST活性分布在70%～75%和60%～65%沉淀段,比活力分别为1081.49和596.41 nmol/(min·mg),纯化倍数分别为2.53和2.2.在6种PEG中,PEG10000和PEG20000的纯化效果较好.在中肠和脂肪体中PEG10000沉淀的GST活性峰分别在40%～45%和30%～40%,GST比活力分别为795.11和1 080.18 nmol/(min·mg),纯化倍数分别是2.4和3.97.PEG20000沉淀中肠和脂肪体GST的活性峰分别在25%～40%和25%～45%,比活力分别是767.57和945.96 nmol/(min·mg),纯化倍数分别是2.81和3.05.用GSH-Sepharose 4B纯化中肠GST,GST比活力达到5 888.44nmol/(min·mg),纯化倍数达到107.38.
通過用聚乙烯亞胺(PEI)、硫痠銨、聚乙二醇(PEG)沉澱技術和GSH-Sepharose 4B親和柱對棉鈴蟲Helicoverpa armigera(Hübner)幼蟲中穀胱甘肽S-轉移酶進行瞭部分純化研究.結果錶明PEG10000和PEG20000的純化效果優于硫痠銨的沉澱效果.通過PEI沉澱去覈痠後,再用硫痠銨沉澱,中腸和脂肪體GST活性分佈在70%～75%和60%～65%沉澱段,比活力分彆為1081.49和596.41 nmol/(min·mg),純化倍數分彆為2.53和2.2.在6種PEG中,PEG10000和PEG20000的純化效果較好.在中腸和脂肪體中PEG10000沉澱的GST活性峰分彆在40%～45%和30%～40%,GST比活力分彆為795.11和1 080.18 nmol/(min·mg),純化倍數分彆是2.4和3.97.PEG20000沉澱中腸和脂肪體GST的活性峰分彆在25%～40%和25%～45%,比活力分彆是767.57和945.96 nmol/(min·mg),純化倍數分彆是2.81和3.05.用GSH-Sepharose 4B純化中腸GST,GST比活力達到5 888.44nmol/(min·mg),純化倍數達到107.38.
통과용취을희아알(PEI)、류산안、취을이순(PEG)침정기술화GSH-Sepharose 4B친화주대면령충Helicoverpa armigera(Hübner)유충중곡광감태S-전이매진행료부분순화연구.결과표명PEG10000화PEG20000적순화효과우우류산안적침정효과.통과PEI침정거핵산후,재용류산안침정,중장화지방체GST활성분포재70%～75%화60%～65%침정단,비활력분별위1081.49화596.41 nmol/(min·mg),순화배수분별위2.53화2.2.재6충PEG중,PEG10000화PEG20000적순화효과교호.재중장화지방체중PEG10000침정적GST활성봉분별재40%～45%화30%～40%,GST비활력분별위795.11화1 080.18 nmol/(min·mg),순화배수분별시2.4화3.97.PEG20000침정중장화지방체GST적활성봉분별재25%～40%화25%～45%,비활력분별시767.57화945.96 nmol/(min·mg),순화배수분별시2.81화3.05.용GSH-Sepharose 4B순화중장GST,GST비활력체도5 888.44nmol/(min·mg),순화배수체도107.38.
