中山大学学报（医学科学版）
中山大學學報（醫學科學版）
중산대학학보（의학과학판）
JOURNAL OF SUN YAT-SEN UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCES)
2006年
4期
369-373
,共5页
林意玲%吴平%廖海兰%张培华%何惠娟%江黎明%梁念慈
林意玲%吳平%廖海蘭%張培華%何惠娟%江黎明%樑唸慈
림의령%오평%료해란%장배화%하혜연%강려명%량념자
半边旗%二萜类%翼状胬肉%成纤维细胞%结缔组织生长因子%胶原
半邊旂%二萜類%翼狀胬肉%成纖維細胞%結締組織生長因子%膠原
반변기%이첩류%익상노육%성섬유세포%결체조직생장인자%효원
[目的]观察半边旗二萜类化合物5F(5F)对体外培养的人翼状胬肉成纤维细胞(HPF)增殖和胶原合成及结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响.[方法]利用手术切除的人翼状胬肉组织进行原代细胞培养,即得到HPF.将不同质量不同浓度(0、8、32、128)μg/mL的5F作用于HPF 24 h,通过噻唑蓝比色法(MTT)检测5F对细胞增殖的作用;用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质印迹(Western blot)检测5F对细胞中CTGFmRNA及蛋白表达水平的影响;用化学比色法检测5F对细胞胶原蛋白含量的影响.[结果]在HPF中加入不同质量浓度(0、8、32、128)μg/mL的5F作用24 h,各组剂量的5F均可以明显抑制HPF的增殖(P＜0.01),其半数抑制率(IC50)为32.12μg/mL.在8～128μg/mL的剂量范围内,5F能显著地下调CTGF mRNA(0.69±0.05,0.38±0.06,0.19±0.04,与对照组0.82±0.09比较,P＜0.05或P＜0.01)和CTGF蛋白(82.34±5.16,31.46±4.98,23.28±2.65,与对照组98.12±7.20比较,P＜0.05或P＜0.01)的表达水平,能显著地降低胶原蛋白的含量(13.95±1.49,12.53±0.51,5.89±0.80,与对照组16.19±1.02比较,P＜0.05或P＜0.01),且均有明显的剂量-效应关系.[结论]半边旗二萜类化合物5F能显著地抑制体外培养的HPF的增殖和胶原蛋白的含量,使细胞的CTGF mRNA及蛋白表达明显下调,并且呈显著的量效关系,表明半边旗5F具有体外抗纤维化作用,这为寻找有效治疗HPF的药物提供了新的思路.
[目的]觀察半邊旂二萜類化閤物5F(5F)對體外培養的人翼狀胬肉成纖維細胞(HPF)增殖和膠原閤成及結締組織生長因子(CTGF)錶達的影響.[方法]利用手術切除的人翼狀胬肉組織進行原代細胞培養,即得到HPF.將不同質量不同濃度(0、8、32、128)μg/mL的5F作用于HPF 24 h,通過噻唑藍比色法(MTT)檢測5F對細胞增殖的作用;用逆轉錄聚閤酶鏈反應(RT-PCR)和蛋白質印跡(Western blot)檢測5F對細胞中CTGFmRNA及蛋白錶達水平的影響;用化學比色法檢測5F對細胞膠原蛋白含量的影響.[結果]在HPF中加入不同質量濃度(0、8、32、128)μg/mL的5F作用24 h,各組劑量的5F均可以明顯抑製HPF的增殖(P＜0.01),其半數抑製率(IC50)為32.12μg/mL.在8～128μg/mL的劑量範圍內,5F能顯著地下調CTGF mRNA(0.69±0.05,0.38±0.06,0.19±0.04,與對照組0.82±0.09比較,P＜0.05或P＜0.01)和CTGF蛋白(82.34±5.16,31.46±4.98,23.28±2.65,與對照組98.12±7.20比較,P＜0.05或P＜0.01)的錶達水平,能顯著地降低膠原蛋白的含量(13.95±1.49,12.53±0.51,5.89±0.80,與對照組16.19±1.02比較,P＜0.05或P＜0.01),且均有明顯的劑量-效應關繫.[結論]半邊旂二萜類化閤物5F能顯著地抑製體外培養的HPF的增殖和膠原蛋白的含量,使細胞的CTGF mRNA及蛋白錶達明顯下調,併且呈顯著的量效關繫,錶明半邊旂5F具有體外抗纖維化作用,這為尋找有效治療HPF的藥物提供瞭新的思路.
[목적]관찰반변기이첩류화합물5F(5F)대체외배양적인익상노육성섬유세포(HPF)증식화효원합성급결체조직생장인자(CTGF)표체적영향.[방법]이용수술절제적인익상노육조직진행원대세포배양,즉득도HPF.장불동질량불동농도(0、8、32、128)μg/mL적5F작용우HPF 24 h,통과새서람비색법(MTT)검측5F대세포증식적작용;용역전록취합매련반응(RT-PCR)화단백질인적(Western blot)검측5F대세포중CTGFmRNA급단백표체수평적영향;용화학비색법검측5F대세포효원단백함량적영향.[결과]재HPF중가입불동질량농도(0、8、32、128)μg/mL적5F작용24 h,각조제량적5F균가이명현억제HPF적증식(P＜0.01),기반수억제솔(IC50)위32.12μg/mL.재8～128μg/mL적제량범위내,5F능현저지하조CTGF mRNA(0.69±0.05,0.38±0.06,0.19±0.04,여대조조0.82±0.09비교,P＜0.05혹P＜0.01)화CTGF단백(82.34±5.16,31.46±4.98,23.28±2.65,여대조조98.12±7.20비교,P＜0.05혹P＜0.01)적표체수평,능현저지강저효원단백적함량(13.95±1.49,12.53±0.51,5.89±0.80,여대조조16.19±1.02비교,P＜0.05혹P＜0.01),차균유명현적제량-효응관계.[결론]반변기이첩류화합물5F능현저지억제체외배양적HPF적증식화효원단백적함량,사세포적CTGF mRNA급단백표체명현하조,병차정현저적량효관계,표명반변기5F구유체외항섬유화작용,저위심조유효치료HPF적약물제공료신적사로.
