中国实验诊断学
中國實驗診斷學
중국실험진단학
CHINESE JOURNAL OF LABORATORY DIAGNOSIS
2009年
3期
285-288
,共4页
冯晓燕%陈坤%宋晓国%王国华%朱翠侠%李惠文%韦攀健%张贺秋
馮曉燕%陳坤%宋曉國%王國華%硃翠俠%李惠文%韋攀健%張賀鞦
풍효연%진곤%송효국%왕국화%주취협%리혜문%위반건%장하추
分枝杆菌,结核%38 kD%ESAT-6%CFP10%抗原优势肽段融合抗原
分枝桿菌,結覈%38 kD%ESAT-6%CFP10%抗原優勢肽段融閤抗原
분지간균,결핵%38 kD%ESAT-6%CFP10%항원우세태단융합항원
目的 为了提高结核病诊断试剂的特异性和敏感性,构建了结核分枝杆菌抗原优势肽段融合抗原38 kD-ESAT6-CFP10,并且采用双抗原夹心ELISA方法初步分析了该融合抗原的抗原性.方法 运用生物学软件分析抗原优势肽段并模拟其串联后的三维结构,以确保串联后仍保持良好的抗原性.通过PCR方法分别扩增38 kD、ESAT-6和CFP10抗原优势肽段基因并将其进行连接,然后将融合基因分别连接入pBVIL1和pGEX-4T-2表达载体,在大肠杆菌菌株DH5α中进行表达.将两种不同载体表达的38 kD-ESAT6-CFP10融合抗原分别作为包被抗原和标记抗原,以双抗原夹心ELISA方法初步评价其抗原性.结果 获得了38 kD、ESAT-6和CFP10的抗原优势肽段融合抗原38 kD-ESAT6-CFP10,并在大肠杆菌中进行了高效表达,初步验证所获得的抗原具有良好的抗原性.结论 该种抗原优势肽段融合抗原有望成为结核病血清学诊断的重要候选抗原,并且双抗原夹心ELISA方法有助于提高检测的特异性和敏感性.
目的 為瞭提高結覈病診斷試劑的特異性和敏感性,構建瞭結覈分枝桿菌抗原優勢肽段融閤抗原38 kD-ESAT6-CFP10,併且採用雙抗原夾心ELISA方法初步分析瞭該融閤抗原的抗原性.方法 運用生物學軟件分析抗原優勢肽段併模擬其串聯後的三維結構,以確保串聯後仍保持良好的抗原性.通過PCR方法分彆擴增38 kD、ESAT-6和CFP10抗原優勢肽段基因併將其進行連接,然後將融閤基因分彆連接入pBVIL1和pGEX-4T-2錶達載體,在大腸桿菌菌株DH5α中進行錶達.將兩種不同載體錶達的38 kD-ESAT6-CFP10融閤抗原分彆作為包被抗原和標記抗原,以雙抗原夾心ELISA方法初步評價其抗原性.結果 穫得瞭38 kD、ESAT-6和CFP10的抗原優勢肽段融閤抗原38 kD-ESAT6-CFP10,併在大腸桿菌中進行瞭高效錶達,初步驗證所穫得的抗原具有良好的抗原性.結論 該種抗原優勢肽段融閤抗原有望成為結覈病血清學診斷的重要候選抗原,併且雙抗原夾心ELISA方法有助于提高檢測的特異性和敏感性.
목적 위료제고결핵병진단시제적특이성화민감성,구건료결핵분지간균항원우세태단융합항원38 kD-ESAT6-CFP10,병차채용쌍항원협심ELISA방법초보분석료해융합항원적항원성.방법 운용생물학연건분석항원우세태단병모의기천련후적삼유결구,이학보천련후잉보지량호적항원성.통과PCR방법분별확증38 kD、ESAT-6화CFP10항원우세태단기인병장기진행련접,연후장융합기인분별련접입pBVIL1화pGEX-4T-2표체재체,재대장간균균주DH5α중진행표체.장량충불동재체표체적38 kD-ESAT6-CFP10융합항원분별작위포피항원화표기항원,이쌍항원협심ELISA방법초보평개기항원성.결과 획득료38 kD、ESAT-6화CFP10적항원우세태단융합항원38 kD-ESAT6-CFP10,병재대장간균중진행료고효표체,초보험증소획득적항원구유량호적항원성.결론 해충항원우세태단융합항원유망성위결핵병혈청학진단적중요후선항원,병차쌍항원협심ELISA방법유조우제고검측적특이성화민감성.
