医学分子生物学杂志
醫學分子生物學雜誌
의학분자생물학잡지
FOREIGN MEDICAL SCIENCES
2009年
5期
387-390
,共4页
贾玉红%马天舒%姜妙娜%孙杰%李淑艳%贾弘禔
賈玉紅%馬天舒%薑妙娜%孫傑%李淑豔%賈弘禔
가옥홍%마천서%강묘나%손걸%리숙염%가홍제
GluR2%神经元%pGL3-Basic%基因表达构建%萤火虫荧光素酶
GluR2%神經元%pGL3-Basic%基因錶達構建%螢火蟲熒光素酶
GluR2%신경원%pGL3-Basic%기인표체구건%형화충형광소매
目的 构建大鼠GluR2基因启动子控制的萤火虫荧光素酶表达载体,并检测其在神经元中的表达.方法 采用PCR方法获得GluR2基因启动子区目的 片段(-298～﹢283),双酶切后插入到pGL3-Basic载体中构成重组表达载体,使萤火虫荧光素酶报告基因的表达受GluR2启动子控制.将构建的重组表达载体或pGL3-Basic载体分别与内参质粒pRL-CMV(表达海肾荧光素酶)共转染原代培养皮质神经元,24 h后用双荧光检测试剂盒测定萤火虫荧光素酶及海肾荧光素酶活性.结果 重组表达载体经双酶切及测序鉴定证明构建正确,该重组表达载体在神经元中特异性高表达萤火虫荧光素酶.结论 成功构建大鼠GluR2基因启动子控制的萤火虫荧光素酶表达载体,并检测到该载体在神经元中的特异性表达.
目的 構建大鼠GluR2基因啟動子控製的螢火蟲熒光素酶錶達載體,併檢測其在神經元中的錶達.方法 採用PCR方法穫得GluR2基因啟動子區目的 片段(-298～﹢283),雙酶切後插入到pGL3-Basic載體中構成重組錶達載體,使螢火蟲熒光素酶報告基因的錶達受GluR2啟動子控製.將構建的重組錶達載體或pGL3-Basic載體分彆與內參質粒pRL-CMV(錶達海腎熒光素酶)共轉染原代培養皮質神經元,24 h後用雙熒光檢測試劑盒測定螢火蟲熒光素酶及海腎熒光素酶活性.結果 重組錶達載體經雙酶切及測序鑒定證明構建正確,該重組錶達載體在神經元中特異性高錶達螢火蟲熒光素酶.結論 成功構建大鼠GluR2基因啟動子控製的螢火蟲熒光素酶錶達載體,併檢測到該載體在神經元中的特異性錶達.
목적 구건대서GluR2기인계동자공제적형화충형광소매표체재체,병검측기재신경원중적표체.방법 채용PCR방법획득GluR2기인계동자구목적 편단(-298～﹢283),쌍매절후삽입도pGL3-Basic재체중구성중조표체재체,사형화충형광소매보고기인적표체수GluR2계동자공제.장구건적중조표체재체혹pGL3-Basic재체분별여내삼질립pRL-CMV(표체해신형광소매)공전염원대배양피질신경원,24 h후용쌍형광검측시제합측정형화충형광소매급해신형광소매활성.결과 중조표체재체경쌍매절급측서감정증명구건정학,해중조표체재체재신경원중특이성고표체형화충형광소매.결론 성공구건대서GluR2기인계동자공제적형화충형광소매표체재체,병검측도해재체재신경원중적특이성표체.
