华南师范大学学报（自然科学版）
華南師範大學學報（自然科學版）
화남사범대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF SOUTH CHINA NORMAL UNIVERSITY （NATURAL SCIENCE EDITION）
2010年
1期
52-57
,共6页
汪洁%王立强%石岩%郑华%陆祖康
汪潔%王立彊%石巖%鄭華%陸祖康
왕길%왕립강%석암%정화%륙조강
毛细管电泳%电场强度%迁移率%分辨率
毛細管電泳%電場彊度%遷移率%分辨率
모세관전영%전장강도%천이솔%분변솔
使用2种不同质量分数(4%和6%)的线性聚丙烯酰胺(Linear Polyacrylamide,LPA)作为筛分介质,对片段长度为80～584 bp 的标准DNA样品进行毛细管电泳. 利用激光诱导荧光方法检测信号,荧光染料为溴化乙啶. 改变电场强度从100～375 V/cm,得到电泳电流、迁移率、信号强度、半峰宽以及分辨率的变化曲线. 实验测得电场强度与电流有很好的线性关系,非线性度参数γ分别为0.999 44和0.998 76. 迁移率曲线与电场强度、DNA片段长度成复杂的函数关系,DNA的迁移率依赖于电场强度、筛分介质质量分数和片段长度;电场强度对信号强度的影响较小,筛分介质的质量分数对区带展宽有影响,因此也影响了信号强度,使用4% LPA比6% LPA区带展宽小,信号强度高,更适合分离片段长度≤600 bp的DNA样品. 电场强度对分辨率的影响十分复杂,增大电场强度并不能提高分辨率,为了提高分辨率,优化分离电场强度为125 V/cm,理论分析对实验起到了很好的指导作用.
使用2種不同質量分數(4%和6%)的線性聚丙烯酰胺(Linear Polyacrylamide,LPA)作為篩分介質,對片段長度為80～584 bp 的標準DNA樣品進行毛細管電泳. 利用激光誘導熒光方法檢測信號,熒光染料為溴化乙啶. 改變電場彊度從100～375 V/cm,得到電泳電流、遷移率、信號彊度、半峰寬以及分辨率的變化麯線. 實驗測得電場彊度與電流有很好的線性關繫,非線性度參數γ分彆為0.999 44和0.998 76. 遷移率麯線與電場彊度、DNA片段長度成複雜的函數關繫,DNA的遷移率依賴于電場彊度、篩分介質質量分數和片段長度;電場彊度對信號彊度的影響較小,篩分介質的質量分數對區帶展寬有影響,因此也影響瞭信號彊度,使用4% LPA比6% LPA區帶展寬小,信號彊度高,更適閤分離片段長度≤600 bp的DNA樣品. 電場彊度對分辨率的影響十分複雜,增大電場彊度併不能提高分辨率,為瞭提高分辨率,優化分離電場彊度為125 V/cm,理論分析對實驗起到瞭很好的指導作用.
사용2충불동질량분수(4%화6%)적선성취병희선알(Linear Polyacrylamide,LPA)작위사분개질,대편단장도위80～584 bp 적표준DNA양품진행모세관전영. 이용격광유도형광방법검측신호,형광염료위추화을정. 개변전장강도종100～375 V/cm,득도전영전류、천이솔、신호강도、반봉관이급분변솔적변화곡선. 실험측득전장강도여전류유흔호적선성관계,비선성도삼수γ분별위0.999 44화0.998 76. 천이솔곡선여전장강도、DNA편단장도성복잡적함수관계,DNA적천이솔의뢰우전장강도、사분개질질량분수화편단장도;전장강도대신호강도적영향교소,사분개질적질량분수대구대전관유영향,인차야영향료신호강도,사용4% LPA비6% LPA구대전관소,신호강도고,경괄합분리편단장도≤600 bp적DNA양품. 전장강도대분변솔적영향십분복잡,증대전장강도병불능제고분변솔,위료제고분변솔,우화분리전장강도위125 V/cm,이론분석대실험기도료흔호적지도작용.
