中国医科大学学报
中國醫科大學學報
중국의과대학학보
JOURNAL OF CHINA MEDICAL UNIVERSITY
2010年
8期
599-602
,共4页
何凡%何志义%李蕾%秦雪%邓淑敏%刘芳%阮杏林%冯程程
何凡%何誌義%李蕾%秦雪%鄧淑敏%劉芳%阮杏林%馮程程
하범%하지의%리뢰%진설%산숙민%류방%원행림%풍정정
Bcl-2基因%基因转导%骨髓间充质干细胞
Bcl-2基因%基因轉導%骨髓間充質榦細胞
Bcl-2기인%기인전도%골수간충질간세포
目的 构建稳定表达Bcl-2基因的大鼠骨髓间充质干细胞(MSC)载体,观察Bcl-2基因转染对骨髓间充质干细胞生物特性的影响及体外模拟缺血性损伤的保护作用.方法 用RT-PER技术扩增小鼠Bcl-2 cDNA,慢病毒介导的基因转导骨髓间充质干细胞,转导后的细胞用Puromycin筛选,RT-PER法检测转染后Bcl-2的表达,采用血清剥夺和缺氧(SOD)处理建立MSC体外模拟缺血性损伤模型,通过流式细胞术评价转染Bcl-2基因的MSC和未转染的MSC的凋亡及存活情况.对转导Bcl-2的MSC神经诱导及检测.结果 转导Bcl-2基因的MSC经Puromycin筛选后可稳定、高效表达Bcl-2蛋白;流式细胞术检测显示:和MSC相比,转导Bcl-2基因的MSC在SOD后凋亡细胞较少,存活细胞较多.转导Bcl-2基因的MSC仍具有向神经细胞分化的潜能.结论 慢病毒介导的Bcl-2基因转导MSC有其蛋白的稳定表达,Bcl-2基因转导可对抗MSC体外模拟缺血性损伤引起的细胞凋亡,从而具有保护性作用,且不影响MSC向神经细胞分化的潜能.
目的 構建穩定錶達Bcl-2基因的大鼠骨髓間充質榦細胞(MSC)載體,觀察Bcl-2基因轉染對骨髓間充質榦細胞生物特性的影響及體外模擬缺血性損傷的保護作用.方法 用RT-PER技術擴增小鼠Bcl-2 cDNA,慢病毒介導的基因轉導骨髓間充質榦細胞,轉導後的細胞用Puromycin篩選,RT-PER法檢測轉染後Bcl-2的錶達,採用血清剝奪和缺氧(SOD)處理建立MSC體外模擬缺血性損傷模型,通過流式細胞術評價轉染Bcl-2基因的MSC和未轉染的MSC的凋亡及存活情況.對轉導Bcl-2的MSC神經誘導及檢測.結果 轉導Bcl-2基因的MSC經Puromycin篩選後可穩定、高效錶達Bcl-2蛋白;流式細胞術檢測顯示:和MSC相比,轉導Bcl-2基因的MSC在SOD後凋亡細胞較少,存活細胞較多.轉導Bcl-2基因的MSC仍具有嚮神經細胞分化的潛能.結論 慢病毒介導的Bcl-2基因轉導MSC有其蛋白的穩定錶達,Bcl-2基因轉導可對抗MSC體外模擬缺血性損傷引起的細胞凋亡,從而具有保護性作用,且不影響MSC嚮神經細胞分化的潛能.
목적 구건은정표체Bcl-2기인적대서골수간충질간세포(MSC)재체,관찰Bcl-2기인전염대골수간충질간세포생물특성적영향급체외모의결혈성손상적보호작용.방법 용RT-PER기술확증소서Bcl-2 cDNA,만병독개도적기인전도골수간충질간세포,전도후적세포용Puromycin사선,RT-PER법검측전염후Bcl-2적표체,채용혈청박탈화결양(SOD)처리건립MSC체외모의결혈성손상모형,통과류식세포술평개전염Bcl-2기인적MSC화미전염적MSC적조망급존활정황.대전도Bcl-2적MSC신경유도급검측.결과 전도Bcl-2기인적MSC경Puromycin사선후가은정、고효표체Bcl-2단백;류식세포술검측현시:화MSC상비,전도Bcl-2기인적MSC재SOD후조망세포교소,존활세포교다.전도Bcl-2기인적MSC잉구유향신경세포분화적잠능.결론 만병독개도적Bcl-2기인전도MSC유기단백적은정표체,Bcl-2기인전도가대항MSC체외모의결혈성손상인기적세포조망,종이구유보호성작용,차불영향MSC향신경세포분화적잠능.
