中国现代普通外科进展
中國現代普通外科進展
중국현대보통외과진전
CHINESE JOURNAL OF CURRENT ADVANCES IN GENERAL SURGERY
2010年
10期
761-765
,共5页
王明明%黎莉%许继映%王东芳%韩明勇%苏忠学
王明明%黎莉%許繼映%王東芳%韓明勇%囌忠學
왕명명%려리%허계영%왕동방%한명용%소충학
白细胞介素18%结直肠肿瘤%细胞系%肿瘤%转染%肿瘤原性
白細胞介素18%結直腸腫瘤%細胞繫%腫瘤%轉染%腫瘤原性
백세포개소18%결직장종류%세포계%종류%전염%종류원성
目的:建立转染人白细胞介素-18(hIL-18)基因的大肠癌细胞株,并研究IL-18基因转染后SW480细胞肿瘤原性的改变.方法:将携带hIL-18的质粒pcDNA3.1-hIL-18转导入人大肠癌细胞系SW480细胞中,通过药物G-418进行筛选,利用RT-PCR和ELISA法对IL-18的表达进行检测;通过裸鼠致瘤实验观察肿瘤原性的改变.结果:IL-18基因成功转导入SW480细胞中并能顺利表达;RT-PCR电泳结果显示IL-18基因在mRNA水平有表达;ELISA结果显示,106个转染细胞在24 h内分泌IL-18的含量是(145.71±4.42)pg;空载体转染的细胞未检测到hIL-18;生长曲线显示转染hIL-18基因后的细胞生长明显减慢;黏附曲线显示SW480-hIL-18组的黏附率在各个时相点均明显升高,而空 载体组和空白对照组之间差异无统计学意义(P<0.05).裸鼠致瘤实验表明,接种SW480-hIL-18细胞的裸鼠肿瘤体积明显小于SW480组和SW480-pcDNA3.1组;抗瘤实验结果显示,放射灭活的SW480-pcDNA3.1细胞和SW480-hIL-18细胞免疫接种裸鼠后,再接种SW480细胞于裸鼠左侧背部皮下,SW480-hIL-18细胞免疫接种组肿瘤长出的时间比SW480-pcDNA3.1细胞免疫接种组明显延长,并且肿瘤的生长速度明显低于SW480细胞免疫接种组.结论:hIL-18基因能成功整合到SW480细胞基因组中,并且能在转染的肿瘤细胞中持续表达.hIL-18基因转导后的SW480细胞生长受到抑制,黏附能力增强,hIL-18基因转染降低了SW480细胞的肿瘤原性;hIL-18基因修饰的SW480细胞具有明显的抗肿瘤作用,为大肠癌基因工程肿瘤疫苗的研制提供了实验基础.
目的:建立轉染人白細胞介素-18(hIL-18)基因的大腸癌細胞株,併研究IL-18基因轉染後SW480細胞腫瘤原性的改變.方法:將攜帶hIL-18的質粒pcDNA3.1-hIL-18轉導入人大腸癌細胞繫SW480細胞中,通過藥物G-418進行篩選,利用RT-PCR和ELISA法對IL-18的錶達進行檢測;通過裸鼠緻瘤實驗觀察腫瘤原性的改變.結果:IL-18基因成功轉導入SW480細胞中併能順利錶達;RT-PCR電泳結果顯示IL-18基因在mRNA水平有錶達;ELISA結果顯示,106箇轉染細胞在24 h內分泌IL-18的含量是(145.71±4.42)pg;空載體轉染的細胞未檢測到hIL-18;生長麯線顯示轉染hIL-18基因後的細胞生長明顯減慢;黏附麯線顯示SW480-hIL-18組的黏附率在各箇時相點均明顯升高,而空 載體組和空白對照組之間差異無統計學意義(P<0.05).裸鼠緻瘤實驗錶明,接種SW480-hIL-18細胞的裸鼠腫瘤體積明顯小于SW480組和SW480-pcDNA3.1組;抗瘤實驗結果顯示,放射滅活的SW480-pcDNA3.1細胞和SW480-hIL-18細胞免疫接種裸鼠後,再接種SW480細胞于裸鼠左側揹部皮下,SW480-hIL-18細胞免疫接種組腫瘤長齣的時間比SW480-pcDNA3.1細胞免疫接種組明顯延長,併且腫瘤的生長速度明顯低于SW480細胞免疫接種組.結論:hIL-18基因能成功整閤到SW480細胞基因組中,併且能在轉染的腫瘤細胞中持續錶達.hIL-18基因轉導後的SW480細胞生長受到抑製,黏附能力增彊,hIL-18基因轉染降低瞭SW480細胞的腫瘤原性;hIL-18基因脩飾的SW480細胞具有明顯的抗腫瘤作用,為大腸癌基因工程腫瘤疫苗的研製提供瞭實驗基礎.
목적:건립전염인백세포개소-18(hIL-18)기인적대장암세포주,병연구IL-18기인전염후SW480세포종류원성적개변.방법:장휴대hIL-18적질립pcDNA3.1-hIL-18전도입인대장암세포계SW480세포중,통과약물G-418진행사선,이용RT-PCR화ELISA법대IL-18적표체진행검측;통과라서치류실험관찰종류원성적개변.결과:IL-18기인성공전도입SW480세포중병능순리표체;RT-PCR전영결과현시IL-18기인재mRNA수평유표체;ELISA결과현시,106개전염세포재24 h내분비IL-18적함량시(145.71±4.42)pg;공재체전염적세포미검측도hIL-18;생장곡선현시전염hIL-18기인후적세포생장명현감만;점부곡선현시SW480-hIL-18조적점부솔재각개시상점균명현승고,이공 재체조화공백대조조지간차이무통계학의의(P<0.05).라서치류실험표명,접충SW480-hIL-18세포적라서종류체적명현소우SW480조화SW480-pcDNA3.1조;항류실험결과현시,방사멸활적SW480-pcDNA3.1세포화SW480-hIL-18세포면역접충라서후,재접충SW480세포우라서좌측배부피하,SW480-hIL-18세포면역접충조종류장출적시간비SW480-pcDNA3.1세포면역접충조명현연장,병차종류적생장속도명현저우SW480세포면역접충조.결론:hIL-18기인능성공정합도SW480세포기인조중,병차능재전염적종류세포중지속표체.hIL-18기인전도후적SW480세포생장수도억제,점부능력증강,hIL-18기인전염강저료SW480세포적종류원성;hIL-18기인수식적SW480세포구유명현적항종류작용,위대장암기인공정종류역묘적연제제공료실험기출.
