生物学杂志
生物學雜誌
생물학잡지
JOURNAL OF BIOLOGY
2011年
1期
6-9
,共4页
蜘蛛鞭毛状丝%重组蛋白%基因表达%密码子优化
蜘蛛鞭毛狀絲%重組蛋白%基因錶達%密碼子優化
지주편모상사%중조단백%기인표체%밀마자우화
利用大腹园蛛基因组文库筛选获得一段693 bp基因片段,经分析该段基因处于鞭毛状丝基因重复区域,且其中包含了一个完整的重复框架.通过基因密码子优化,在其3'和5'端分别融合蛋白质亲和层析标签,克隆于pET30LIC表达载体中,在不同的大肠杆茵中进行表达试验.实验结果显示:经过密码子优化,融合目的蛋白基因在BL21(DE3)中得到了高效表达,产量达到25～30mg/L,纯化产物纯度达90%以上.SDS-PAGE和Western-blotting 检测目的融合蛋白均与预期蛋白大小一致.
利用大腹園蛛基因組文庫篩選穫得一段693 bp基因片段,經分析該段基因處于鞭毛狀絲基因重複區域,且其中包含瞭一箇完整的重複框架.通過基因密碼子優化,在其3'和5'耑分彆融閤蛋白質親和層析標籤,剋隆于pET30LIC錶達載體中,在不同的大腸桿茵中進行錶達試驗.實驗結果顯示:經過密碼子優化,融閤目的蛋白基因在BL21(DE3)中得到瞭高效錶達,產量達到25～30mg/L,純化產物純度達90%以上.SDS-PAGE和Western-blotting 檢測目的融閤蛋白均與預期蛋白大小一緻.
이용대복완주기인조문고사선획득일단693 bp기인편단,경분석해단기인처우편모상사기인중복구역,차기중포함료일개완정적중복광가.통과기인밀마자우화,재기3'화5'단분별융합단백질친화층석표첨,극륭우pET30LIC표체재체중,재불동적대장간인중진행표체시험.실험결과현시:경과밀마자우화,융합목적단백기인재BL21(DE3)중득도료고효표체,산량체도25～30mg/L,순화산물순도체90%이상.SDS-PAGE화Western-blotting 검측목적융합단백균여예기단백대소일치.
