CAJ | 학술논문

在枯草芽孢杆菌B.subtilis168菌株,以及在其改造菌株B.subtilis168wprA和B.subtilis168/wprA::csaA中表达来自碱性芽孢杆菌C-125的碱性果胶酶和来自巨大芽孢杆菌的青霉素酰化酶.碱性果胶酶在B.subtilis中分泌表达时,敲除了wprA蛋白酶基因的B.subtilis168wprA菌株相对于其野生型菌株B.subtilis168分泌表达的总的酶活力下降了36%,再次整合csaA进wprA位点后的B.subtilis168/wprA::csaA菌株,其表达量又恢复到相当于野生型菌株的表达水平.青霉素酰化酶在B.subtilis168wprA-菌株中的表达与野生型相比没有明显差异;而整合csaA分子伴侣进wprA位点后的菌株(B.subtilis168/wprA::csaA),相对于野生型其总的酶活力高出66%,说明分子伴侣CsaA数量的增加可以明显提高酶的表达量,并显示出普遍提高蛋白总活力的作用,而蛋白酶wprA基因的敲除,对某些蛋白的表达量能够产生明显的影响,在提高表达的稳定性方面表现出普遍的促进作用.本实验表达的青霉素酰化酶酶活力(14.7 U/mL)比工业应用中的酶活力(10 U/mL)高出了47%.
재고초아포간균B.subtilis168균주,이급재기개조균주B.subtilis168wprA화B.subtilis168/wprA::csaA중표체래자감성아포간균C-125적감성과효매화래자거대아포간균적청매소선화매.감성과효매재B.subtilis중분비표체시,고제료wprA단백매기인적B.subtilis168wprA균주상대우기야생형균주B.subtilis168분비표체적총적매활력하강료36%,재차정합csaA진wprA위점후적B.subtilis168/wprA::csaA균주,기표체량우회복도상당우야생형균주적표체수평.청매소선화매재B.subtilis168wprA-균주중적표체여야생형상비몰유명현차이;이정합csaA분자반려진wprA위점후적균주(B.subtilis168/wprA::csaA),상대우야생형기총적매활력고출66%,설명분자반려CsaA수량적증가가이명현제고매적표체량,병현시출보편제고단백총활력적작용,이단백매wprA기인적고제,대모사단백적표체량능구산생명현적영향,재제고표체적은정성방면표현출보편적촉진작용.본실험표체적청매소선화매매활력(14.7 U/mL)비공업응용중적매활력(10 U/mL)고출료47%.