生物技术通报
生物技術通報
생물기술통보
BIOTECHNOLOGY BULLETIN
2011年
3期
160-162,174
,共4页
柴晓杰%王晓庆%张婷%代靖宇
柴曉傑%王曉慶%張婷%代靖宇
시효걸%왕효경%장정%대정우
轮状病毒%PCR%克隆%表达
輪狀病毒%PCR%剋隆%錶達
륜상병독%PCR%극륭%표체
应用聚合酶链式反应技术(PC R)扩增轮状病毒V P7基因,并将其克隆到pMD18-T simple载体上,对重组子进行PCR检测和限制性内切酶分析,并测定DNA全序列.结果显示,克隆片段全长为981 by.将轮状病毒V P7基因定向的克隆到原核表达载体pET-32a启动子下游,构建原核表达载体pET-32aVP7.将质粒pET-32aVP7转化Transetta表达菌株进行诱导表达,裂解菌体细胞抽提蛋白质进行SDS-PAGE.结果表明,轮状病毒壳蛋白VP7基因在Transetta表达菌株内得到成功表达.
應用聚閤酶鏈式反應技術(PC R)擴增輪狀病毒V P7基因,併將其剋隆到pMD18-T simple載體上,對重組子進行PCR檢測和限製性內切酶分析,併測定DNA全序列.結果顯示,剋隆片段全長為981 by.將輪狀病毒V P7基因定嚮的剋隆到原覈錶達載體pET-32a啟動子下遊,構建原覈錶達載體pET-32aVP7.將質粒pET-32aVP7轉化Transetta錶達菌株進行誘導錶達,裂解菌體細胞抽提蛋白質進行SDS-PAGE.結果錶明,輪狀病毒殼蛋白VP7基因在Transetta錶達菌株內得到成功錶達.
응용취합매련식반응기술(PC R)확증륜상병독V P7기인,병장기극륭도pMD18-T simple재체상,대중조자진행PCR검측화한제성내절매분석,병측정DNA전서렬.결과현시,극륭편단전장위981 by.장륜상병독V P7기인정향적극륭도원핵표체재체pET-32a계동자하유,구건원핵표체재체pET-32aVP7.장질립pET-32aVP7전화Transetta표체균주진행유도표체,렬해균체세포추제단백질진행SDS-PAGE.결과표명,륜상병독각단백VP7기인재Transetta표체균주내득도성공표체.
