华北农学报
華北農學報
화북농학보
ACTA AGRICULTURAE BOREALI-SINICA
2011年
4期
61-66
,共6页
李淼%李春玲%叶严锋%宋帅%杨冬霞
李淼%李春玲%葉嚴鋒%宋帥%楊鼕霞
리묘%리춘령%협엄봉%송수%양동하
副猪嗜血杆菌%重组Omp P2%间接ELISA
副豬嗜血桿菌%重組Omp P2%間接ELISA
부저기혈간균%중조Omp P2%간접ELISA
旨在建立一种基于重组副猪嗜血杆菌(HPS)外膜蛋白(Omp) P2的检测副猪嗜血杆菌抗体的间接ELISA方法.将重组表达的Omp P2纯化后作为ELISA包被抗原,建立了一种基于重组P2蛋白的间接ELISA方法,并对此方法的反应条件进行了优化.确定ELISA的最佳条件为:抗原包被浓度为1.5 μg/mL,被检血清1∶80稀释,辣根过氧化物酶标记的羊抗猪IgG(二抗)1∶4000稀释.确定的阴性血清临界D450nm值为0.231,阳性血清临界D450nm值为0.280.将该ELISA方法与加拿大Biovet公司生产的副猪嗜血杆菌抗体检测试剂盒做相关比较,结果符合率为88.9%.本试验建立的方法具有良好的特异性,可以用于HPS抗体的检测.
旨在建立一種基于重組副豬嗜血桿菌(HPS)外膜蛋白(Omp) P2的檢測副豬嗜血桿菌抗體的間接ELISA方法.將重組錶達的Omp P2純化後作為ELISA包被抗原,建立瞭一種基于重組P2蛋白的間接ELISA方法,併對此方法的反應條件進行瞭優化.確定ELISA的最佳條件為:抗原包被濃度為1.5 μg/mL,被檢血清1∶80稀釋,辣根過氧化物酶標記的羊抗豬IgG(二抗)1∶4000稀釋.確定的陰性血清臨界D450nm值為0.231,暘性血清臨界D450nm值為0.280.將該ELISA方法與加拿大Biovet公司生產的副豬嗜血桿菌抗體檢測試劑盒做相關比較,結果符閤率為88.9%.本試驗建立的方法具有良好的特異性,可以用于HPS抗體的檢測.
지재건립일충기우중조부저기혈간균(HPS)외막단백(Omp) P2적검측부저기혈간균항체적간접ELISA방법.장중조표체적Omp P2순화후작위ELISA포피항원,건립료일충기우중조P2단백적간접ELISA방법,병대차방법적반응조건진행료우화.학정ELISA적최가조건위:항원포피농도위1.5 μg/mL,피검혈청1∶80희석,랄근과양화물매표기적양항저IgG(이항)1∶4000희석.학정적음성혈청림계D450nm치위0.231,양성혈청림계D450nm치위0.280.장해ELISA방법여가나대Biovet공사생산적부저기혈간균항체검측시제합주상관비교,결과부합솔위88.9%.본시험건립적방법구유량호적특이성,가이용우HPS항체적검측.