西北植物学报
西北植物學報
서북식물학보
ACTA BOTANICA BOREALI-OCCIDENTALIA SINICA
2012年
4期
829-834
,共6页
张永夏%刘晓%黎科%关于元%胡学强%邹永东
張永夏%劉曉%黎科%關于元%鬍學彊%鄒永東
장영하%류효%려과%관우원%호학강%추영동
杨叶肖槿%ISSR%PCR反应体系%优化
楊葉肖槿%ISSR%PCR反應體繫%優化
양협초근%ISSR%PCR반응체계%우화
针对珍稀植物杨叶肖槿ISSR反应的特点,建立了适用于杨叶肖槿遗传多样性研究的ISSR最适反应体系,具体包括:2.0μL10×Buffer,27.5 ng的模板DNA,2.0 μL的dNTP,(1)U的Pyrobest DNA酶,1.25μmol/L的引物;最佳反应程序为94℃预变性5 min,然后94℃变性l min,49°C退火45 s,72℃延伸1 min,35个循环;最后72℃延伸10 min,4℃终止反应.应用该优化的反应体系筛选出了10条稳定性强、清晰度高而且表现出一定多态性的ISSR引物,并对杨叶肖槿进行了检测,获得了清晰稳定的扩增图谱.
針對珍稀植物楊葉肖槿ISSR反應的特點,建立瞭適用于楊葉肖槿遺傳多樣性研究的ISSR最適反應體繫,具體包括:2.0μL10×Buffer,27.5 ng的模闆DNA,2.0 μL的dNTP,(1)U的Pyrobest DNA酶,1.25μmol/L的引物;最佳反應程序為94℃預變性5 min,然後94℃變性l min,49°C退火45 s,72℃延伸1 min,35箇循環;最後72℃延伸10 min,4℃終止反應.應用該優化的反應體繫篩選齣瞭10條穩定性彊、清晰度高而且錶現齣一定多態性的ISSR引物,併對楊葉肖槿進行瞭檢測,穫得瞭清晰穩定的擴增圖譜.
침대진희식물양협초근ISSR반응적특점,건립료괄용우양협초근유전다양성연구적ISSR최괄반응체계,구체포괄:2.0μL10×Buffer,27.5 ng적모판DNA,2.0 μL적dNTP,(1)U적Pyrobest DNA매,1.25μmol/L적인물;최가반응정서위94℃예변성5 min,연후94℃변성l min,49°C퇴화45 s,72℃연신1 min,35개순배;최후72℃연신10 min,4℃종지반응.응용해우화적반응체계사선출료10조은정성강、청석도고이차표현출일정다태성적ISSR인물,병대양협초근진행료검측,획득료청석은정적확증도보.