山东医药
山東醫藥
산동의약
SHANDONG MEDICAL JOURNAL
2012年
35期
1-4
,共4页
朱莉%王彦亮%黄志锋%何帅%周稚辉%麻健丰
硃莉%王彥亮%黃誌鋒%何帥%週稚輝%痳健豐
주리%왕언량%황지봉%하수%주치휘%마건봉
串珠素%咀嚼肌%免疫组织化学
串珠素%咀嚼肌%免疫組織化學
천주소%저작기%면역조직화학
目的 通过对串珠素核心蛋白多克隆抗体的研究,探讨串珠素在咀嚼肌中的表达特点.方法将 串珠素片段插入到pET32a表达载体中,经EcoRⅠ+SalⅠ酶切鉴定后将正确的质粒转化DH5α大肠杆菌,挑克隆后接种于新鲜LB中.对数培养后经聚丙烯酰胺凝胶电泳及蛋白免疫印迹技术检测融合蛋白的表达,并通过免疫组化检测串珠素在咀嚼肌中的表达.结果 聚丙烯酰胺凝胶电泳结果显示在IPTG诱导组出现明显的蛋白表达,而未经IPTG诱导的大肠杆菌及pET32a空载体均未见表达条带.蛋白免疫印迹结果亦显示插入pET32a载体的序列表达成功.免疫组化示串珠素在咀嚼肌中有显著表达,在肌膜处呈带状聚集.结论 分子克隆技术可以对串珠素进行扩增,不同品系的串珠素蛋白间有交叉免疫原性,串珠素在咀嚼肌肌纤维中有广泛分布.
目的 通過對串珠素覈心蛋白多剋隆抗體的研究,探討串珠素在咀嚼肌中的錶達特點.方法將 串珠素片段插入到pET32a錶達載體中,經EcoRⅠ+SalⅠ酶切鑒定後將正確的質粒轉化DH5α大腸桿菌,挑剋隆後接種于新鮮LB中.對數培養後經聚丙烯酰胺凝膠電泳及蛋白免疫印跡技術檢測融閤蛋白的錶達,併通過免疫組化檢測串珠素在咀嚼肌中的錶達.結果 聚丙烯酰胺凝膠電泳結果顯示在IPTG誘導組齣現明顯的蛋白錶達,而未經IPTG誘導的大腸桿菌及pET32a空載體均未見錶達條帶.蛋白免疫印跡結果亦顯示插入pET32a載體的序列錶達成功.免疫組化示串珠素在咀嚼肌中有顯著錶達,在肌膜處呈帶狀聚集.結論 分子剋隆技術可以對串珠素進行擴增,不同品繫的串珠素蛋白間有交扠免疫原性,串珠素在咀嚼肌肌纖維中有廣汎分佈.
목적 통과대천주소핵심단백다극륭항체적연구,탐토천주소재저작기중적표체특점.방법장 천주소편단삽입도pET32a표체재체중,경EcoRⅠ+SalⅠ매절감정후장정학적질립전화DH5α대장간균,도극륭후접충우신선LB중.대수배양후경취병희선알응효전영급단백면역인적기술검측융합단백적표체,병통과면역조화검측천주소재저작기중적표체.결과 취병희선알응효전영결과현시재IPTG유도조출현명현적단백표체,이미경IPTG유도적대장간균급pET32a공재체균미견표체조대.단백면역인적결과역현시삽입pET32a재체적서렬표체성공.면역조화시천주소재저작기중유현저표체,재기막처정대상취집.결론 분자극륭기술가이대천주소진행확증,불동품계적천주소단백간유교차면역원성,천주소재저작기기섬유중유엄범분포.
