食品与发酵工业
食品與髮酵工業
식품여발효공업
FOOD AND FERMENTATION INDUSTRIES
2003年
11期
20-25
,共6页
木聚糖酶基因%高效表达%诱导条件优化
木聚糖酶基因%高效錶達%誘導條件優化
목취당매기인%고효표체%유도조건우화
海栖热袍菌Thermotoga maritima为嗜极端高温的厌氧细菌,其产生的极耐热性木聚糖酶B具有非常可观的工业应用前景.但编码该酶的基因xynB在大肠杆菌中的表达较困难.文中利用PCR技术将xynB克隆至原核表达载体pET-20b,并与组氨酸标签进行融合构建成重组质粒pET-20-xynB.研究发现,pET-20-xynB在稀有密码子AGA,AGG和AUA得到加强的大肠杆菌宿主菌株BL21-CodonPlus(DE3)-RIL中,木聚糖酶基因的表达水平远远高于在其他菌株中的表达.结合对重组菌的诱导条件的优化,使得重组蛋白表达量达到11.5%,比酶活达到25.69U/mg,比常规基因工程菌株提高12.5倍.
海棲熱袍菌Thermotoga maritima為嗜極耑高溫的厭氧細菌,其產生的極耐熱性木聚糖酶B具有非常可觀的工業應用前景.但編碼該酶的基因xynB在大腸桿菌中的錶達較睏難.文中利用PCR技術將xynB剋隆至原覈錶達載體pET-20b,併與組氨痠標籤進行融閤構建成重組質粒pET-20-xynB.研究髮現,pET-20-xynB在稀有密碼子AGA,AGG和AUA得到加彊的大腸桿菌宿主菌株BL21-CodonPlus(DE3)-RIL中,木聚糖酶基因的錶達水平遠遠高于在其他菌株中的錶達.結閤對重組菌的誘導條件的優化,使得重組蛋白錶達量達到11.5%,比酶活達到25.69U/mg,比常規基因工程菌株提高12.5倍.
해서열포균Thermotoga maritima위기겁단고온적염양세균,기산생적겁내열성목취당매B구유비상가관적공업응용전경.단편마해매적기인xynB재대장간균중적표체교곤난.문중이용PCR기술장xynB극륭지원핵표체재체pET-20b,병여조안산표첨진행융합구건성중조질립pET-20-xynB.연구발현,pET-20-xynB재희유밀마자AGA,AGG화AUA득도가강적대장간균숙주균주BL21-CodonPlus(DE3)-RIL중,목취당매기인적표체수평원원고우재기타균주중적표체.결합대중조균적유도조건적우화,사득중조단백표체량체도11.5%,비매활체도25.69U/mg,비상규기인공정균주제고12.5배.
