CAJ | 학술논문

观察骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)在体外不诱导的条件下视网膜移植于正常或大鼠Nd:YAG激光损伤视网膜后的定位以及蛋白表达情况.体外培养大鼠MSCs,用荧光染料DAPI标记MSCs,视网膜下移植后分别于10,20,35和50天处死动物,做DAPI荧光观察,并在阳性的连续切片上做神经元核(neuronal nuclei,NeuN)、神经元特异性烯醇化酶(neuron specific enolase,NSE)、胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)和角蛋白(pancy- tokeratin,CK)免疫组化染色及HE染色.对损伤大鼠分别于损伤前及损伤后即刻、1～7周检测损伤移植组、损伤组和损伤注射生理盐水组的视网膜电流图(ERG)b波分析.培养的MSCs集落生长迅速,均一性好,DAPI染色观察表明,10天时移植细胞多集中于移植部位周围,正常移植组可见分层,而损伤移植组分布散乱; 20天时两组均可见阳性细胞分布范围扩大,分布于视网膜各层; 35天正常移植组阳性细胞范围与20天基本相同,而损伤组则进一步扩大,且细胞开始向损伤部位迁移; 50天正常移植组荧光范围比35天小,未发现细胞增生,损伤组损伤范围与35天相比扩大不明显,但许多部位有增生.免疫组织化学染色发现阳性区域的细胞在NeuN,NSE,GFAP和CK 的表达有不均一性.HE染色表明移植组损伤的恢复好于损伤对照组,ERG b波检测表明5周后损伤移植组的b波水平高于对照组.MSCs可在正常及激光损伤的大鼠视网膜下与原视网膜结构相融合,检测到的阳性细胞分布于视网膜色素上皮层、视细胞层、双极细胞层及节细胞层,正常移植组随时间延长荧光范围缩小,损伤移植组荧光分布范围随时间延长分布较广,但细胞的排列和蛋白表达有紊乱.MSCs的移植对激光损伤斑及ERG b波的恢复有促进作用.
관찰골수간충질간세포(mesenchymal stem cells,MSCs)재체외불유도적조건하시망막이식우정상혹대서Nd:YAG격광손상시망막후적정위이급단백표체정황.체외배양대서MSCs,용형광염료DAPI표기MSCs,시망막하이식후분별우10,20,35화50천처사동물,주DAPI형광관찰,병재양성적련속절편상주신경원핵(neuronal nuclei,NeuN)、신경원특이성희순화매(neuron specific enolase,NSE)、효질섬유산성단백(glial fibrillary acidic protein,GFAP)화각단백(pancy- tokeratin,CK)면역조화염색급HE염색.대손상대서분별우손상전급손상후즉각、1～7주검측손상이식조、손상조화손상주사생리염수조적시망막전류도(ERG)b파분석.배양적MSCs집락생장신속,균일성호,DAPI염색관찰표명,10천시이식세포다집중우이식부위주위,정상이식조가견분층,이손상이식조분포산란; 20천시량조균가견양성세포분포범위확대,분포우시망막각층; 35천정상이식조양성세포범위여20천기본상동,이손상조칙진일보확대,차세포개시향손상부위천이; 50천정상이식조형광범위비35천소,미발현세포증생,손상조손상범위여35천상비확대불명현,단허다부위유증생.면역조직화학염색발현양성구역적세포재NeuN,NSE,GFAP화CK 적표체유불균일성.HE염색표명이식조손상적회복호우손상대조조,ERG b파검측표명5주후손상이식조적b파수평고우대조조.MSCs가재정상급격광손상적대서시망막하여원시망막결구상융합,검측도적양성세포분포우시망막색소상피층、시세포층、쌍겁세포층급절세포층,정상이식조수시간연장형광범위축소,손상이식조형광분포범위수시간연장분포교엄,단세포적배렬화단백표체유문란.MSCs적이식대격광손상반급ERG b파적회복유촉진작용.