郑州工程学院学报
鄭州工程學院學報
정주공정학원학보
JOURNAL OF ZHENGZHOU INSTITUTE OF TECHNOLOGY
2004年
1期
19-21,28
,共4页
栾春光%马林%郝彦玲%朱本忠%罗云波
欒春光%馬林%郝彥玲%硃本忠%囉雲波
란춘광%마림%학언령%주본충%라운파
竞争定量PCR%非同源模板%35S启动子%转基因玉米
競爭定量PCR%非同源模闆%35S啟動子%轉基因玉米
경쟁정량PCR%비동원모판%35S계동자%전기인옥미
建立了玉米转基因成分中35S启动子非同源模板的竞争定量PCR检测系统.竞争定量PCR的关键问题是内标物的制备.实验中非同源模板的构建是采用PCR方法对大肠杆菌基因组进行低严紧型扩增,回收预期DNA片段并将其构建到T-easy载体上.通过调整非同源模板浓度使竞争物PCR产物亮度与1%GMO玉米的亮度相同,从而确定转基因玉米的检出限为1%.然后以确定的内标物浓度与不同含量的GMO玉米样品进行竞争定量PCR反应,以此进一步确定样品中GMO的含量范围.
建立瞭玉米轉基因成分中35S啟動子非同源模闆的競爭定量PCR檢測繫統.競爭定量PCR的關鍵問題是內標物的製備.實驗中非同源模闆的構建是採用PCR方法對大腸桿菌基因組進行低嚴緊型擴增,迴收預期DNA片段併將其構建到T-easy載體上.通過調整非同源模闆濃度使競爭物PCR產物亮度與1%GMO玉米的亮度相同,從而確定轉基因玉米的檢齣限為1%.然後以確定的內標物濃度與不同含量的GMO玉米樣品進行競爭定量PCR反應,以此進一步確定樣品中GMO的含量範圍.
건립료옥미전기인성분중35S계동자비동원모판적경쟁정량PCR검측계통.경쟁정량PCR적관건문제시내표물적제비.실험중비동원모판적구건시채용PCR방법대대장간균기인조진행저엄긴형확증,회수예기DNA편단병장기구건도T-easy재체상.통과조정비동원모판농도사경쟁물PCR산물량도여1%GMO옥미적량도상동,종이학정전기인옥미적검출한위1%.연후이학정적내표물농도여불동함량적GMO옥미양품진행경쟁정량PCR반응,이차진일보학정양품중GMO적함량범위.
