CAJ | 학술논문

目的:通过腺病毒载体介导CTLA4Ig在大鼠骨髓间质干细胞(MSC)中的表达,探讨MSC作为基因转移靶细胞的可行性和转染效率,研究其在体外对免疫应答的抑制作用.方法:构建含有CTLA4Ig基因的重组腺病毒载体pAd-CTLA4Ig,按照不同的感染倍率(MOI)转染大鼠MSC,用荧光显微镜和流式细胞仪分析转染效率,流式细胞术、Western blotting等方法检测目的蛋白CTLA4Ig在MSC中的表达.将转基因MSC加入混合淋巴细胞反应(MLR)体系,观察其抑制淋巴细胞增殖的生物学效应.结果:重组腺病毒载体pAd-CTLA4Ig对MSC的最大转染率为80.7%±4.7%,转基因MSC可检测到目的蛋白的表达.基因修饰的MSC能有效抑制MLR体系中淋巴细胞的增殖,4d达到最大抑制效率51.46%;再次MLR证实这种抑制作用是供者特异性的.结论:MSC是一种较理想的基因转移靶细胞,其表达的转基因产物CTLA4Ig可在体外特异性地抑制免疫应答.
목적:통과선병독재체개도CTLA4Ig재대서골수간질간세포(MSC)중적표체,탐토MSC작위기인전이파세포적가행성화전염효솔,연구기재체외대면역응답적억제작용.방법:구건함유CTLA4Ig기인적중조선병독재체pAd-CTLA4Ig,안조불동적감염배솔(MOI)전염대서MSC,용형광현미경화류식세포의분석전염효솔,류식세포술、Western blotting등방법검측목적단백CTLA4Ig재MSC중적표체.장전기인MSC가입혼합림파세포반응(MLR)체계,관찰기억제림파세포증식적생물학효응.결과:중조선병독재체pAd-CTLA4Ig대MSC적최대전염솔위80.7%±4.7%,전기인MSC가검측도목적단백적표체.기인수식적MSC능유효억제MLR체계중림파세포적증식,4d체도최대억제효솔51.46%;재차MLR증실저충억제작용시공자특이성적.결론:MSC시일충교이상적기인전이파세포,기표체적전기인산물CTLA4Ig가재체외특이성지억제면역응답.