CAJ | 학술논문

目的:骨形态发生蛋白信号在神经细胞的生长、分化、增殖、凋亡等方面发挥作用,而Sonic hedgehog能调节小脑颗粒细胞的增殖,故实验设计了去除骨形态发生蛋白信号后Sonic hedgehog信号在小脑颗粒细胞发育中作用的观察.方法:实验于2004-11/2005-10在美国费城儿童医院Crenshaw实验室和北京大学医学部解剖学神经研究实验室完成.①实验材料:C57BI/6J小鼠40只;Bmpr1b敲除鼠系来源于Karen Lyons博士.②实验过程:通过敲除骨形态发生蛋白Ⅰ型受体的Bmpr1a和Bmpr1b两个亚型基因,去除骨形态发生蛋白信号在小脑内的传导.③实验评估:使用原位杂交和免疫组织化学方法检测了新生幼鼠小脑中Sonic hedgehog信号的表达情况.结果:①在胚胎11.5 d,磷酸化SMAD免疫阳性的细胞被观察到在正常鼠神经管背侧的菱形唇附近,受体基因双敲除的小鼠背侧神经管中未发现免疫阳性细胞,此结果提示通过骨形态发生蛋白Ⅰ型受体传导的骨形态发生蛋白信号已消失.当小鼠出生后,磷酸化SMAD免疫阳性细胞主要位于正常小鼠的内颗粒层,在基因敲除鼠只有一小部分区域有磷酸化SMAD蛋白的表达.②Sonic hedgehog表达在正常新生鼠小脑的颗粒细胞层和蒲肯野氏细胞层;基因敲除鼠Sonic hedgehog信号只表达在小脑一小部分区域的颗粒细胞层和蒲肯野氏细胞层,而大部分区域则缺少它的表达.PTCH和N-myc在小脑中的表达与Sonic hedgehog表达部位类似.这提示Sonic hedgehog信号及其PTCH和N-myc都参与了小脑颗粒细胞的发育.结论:实验阐明了骨形态发生蛋白信号去除后,Sonic hedgehog信号对小脑颗粒细胞发育所起到的重要作用.
목적:골형태발생단백신호재신경세포적생장、분화、증식、조망등방면발휘작용,이Sonic hedgehog능조절소뇌과립세포적증식,고실험설계료거제골형태발생단백신호후Sonic hedgehog신호재소뇌과립세포발육중작용적관찰.방법:실험우2004-11/2005-10재미국비성인동의원Crenshaw실험실화북경대학의학부해부학신경연구실험실완성.①실험재료:C57BI/6J소서40지;Bmpr1b고제서계래원우Karen Lyons박사.②실험과정:통과고제골형태발생단백Ⅰ형수체적Bmpr1a화Bmpr1b량개아형기인,거제골형태발생단백신호재소뇌내적전도.③실험평고:사용원위잡교화면역조직화학방법검측료신생유서소뇌중Sonic hedgehog신호적표체정황.결과:①재배태11.5 d,린산화SMAD면역양성적세포피관찰도재정상서신경관배측적릉형진부근,수체기인쌍고제적소서배측신경관중미발현면역양성세포,차결과제시통과골형태발생단백Ⅰ형수체전도적골형태발생단백신호이소실.당소서출생후,린산화SMAD면역양성세포주요위우정상소서적내과립층,재기인고제서지유일소부분구역유린산화SMAD단백적표체.②Sonic hedgehog표체재정상신생서소뇌적과립세포층화포긍야씨세포층;기인고제서Sonic hedgehog신호지표체재소뇌일소부분구역적과립세포층화포긍야씨세포층,이대부분구역칙결소타적표체.PTCH화N-myc재소뇌중적표체여Sonic hedgehog표체부위유사.저제시Sonic hedgehog신호급기PTCH화N-myc도삼여료소뇌과립세포적발육.결론:실험천명료골형태발생단백신호거제후,Sonic hedgehog신호대소뇌과립세포발육소기도적중요작용.