卒中与神经疾病
卒中與神經疾病
졸중여신경질병
2008年
2期
85-88
,共4页
郑丽芳%梅元武%张小乔%张红%白静%查运红
鄭麗芳%梅元武%張小喬%張紅%白靜%查運紅
정려방%매원무%장소교%장홍%백정%사운홍
转化生长因子β1%骨髓间充质干细胞%缺血性损伤%Bcl-xL
轉化生長因子β1%骨髓間充質榦細胞%缺血性損傷%Bcl-xL
전화생장인자β1%골수간충질간세포%결혈성손상%Bcl-xL
目的 观察转化生长因子β1(TGF-β1)对骨髓间充质干细胞(MSCs)体外模拟缺血性损伤的保护作用.方法 采用密度梯度离心结合贴壁法分离、培养大鼠MSCs,对培养第3代的MSCs进行鉴定;用TGF-β11、2、5 rig/m1分别预处理细胞6 h,然后用血清剥夺和缺氧(SOD)处理建立MSCs体外模拟缺血性损伤模型,通过流式细胞术评价MSCs的凋亡及存活情况;采用Western blot方法检测2 ng/ml TGF-β1对Bcl-xL表达的影响.结果 密度梯度离心结合贴壁法能有效分离、纯化大鼠MSCs,免疫荧光检测显示培养的细胞CD29表达阳性,而CD34表达阴性;AnnexinV/PI双染流式细胞仪结果显示用2 ng/ml TGF-β1预处理MSCs后,可抑制SOD诱导的细胞凋亡,其凋亡率明显下降,和其它组比较具有显著性差异(P<0.01);Western blot显示2-g/ml TGF-β1可升高Bcl-xL的表达,Bd-xL/GAPDH(1.06±0.15)在6 h达到高峰,和其它时间点比较具有显著性差异(P<0.01或P<0.05).结论 TGF-β1对SOD诱导的MSCs的凋亡具有抑制作用,其抗凋亡作用可能是通过促进Bcl-xL表达实现的.
目的 觀察轉化生長因子β1(TGF-β1)對骨髓間充質榦細胞(MSCs)體外模擬缺血性損傷的保護作用.方法 採用密度梯度離心結閤貼壁法分離、培養大鼠MSCs,對培養第3代的MSCs進行鑒定;用TGF-β11、2、5 rig/m1分彆預處理細胞6 h,然後用血清剝奪和缺氧(SOD)處理建立MSCs體外模擬缺血性損傷模型,通過流式細胞術評價MSCs的凋亡及存活情況;採用Western blot方法檢測2 ng/ml TGF-β1對Bcl-xL錶達的影響.結果 密度梯度離心結閤貼壁法能有效分離、純化大鼠MSCs,免疫熒光檢測顯示培養的細胞CD29錶達暘性,而CD34錶達陰性;AnnexinV/PI雙染流式細胞儀結果顯示用2 ng/ml TGF-β1預處理MSCs後,可抑製SOD誘導的細胞凋亡,其凋亡率明顯下降,和其它組比較具有顯著性差異(P<0.01);Western blot顯示2-g/ml TGF-β1可升高Bcl-xL的錶達,Bd-xL/GAPDH(1.06±0.15)在6 h達到高峰,和其它時間點比較具有顯著性差異(P<0.01或P<0.05).結論 TGF-β1對SOD誘導的MSCs的凋亡具有抑製作用,其抗凋亡作用可能是通過促進Bcl-xL錶達實現的.
목적 관찰전화생장인자β1(TGF-β1)대골수간충질간세포(MSCs)체외모의결혈성손상적보호작용.방법 채용밀도제도리심결합첩벽법분리、배양대서MSCs,대배양제3대적MSCs진행감정;용TGF-β11、2、5 rig/m1분별예처리세포6 h,연후용혈청박탈화결양(SOD)처리건립MSCs체외모의결혈성손상모형,통과류식세포술평개MSCs적조망급존활정황;채용Western blot방법검측2 ng/ml TGF-β1대Bcl-xL표체적영향.결과 밀도제도리심결합첩벽법능유효분리、순화대서MSCs,면역형광검측현시배양적세포CD29표체양성,이CD34표체음성;AnnexinV/PI쌍염류식세포의결과현시용2 ng/ml TGF-β1예처리MSCs후,가억제SOD유도적세포조망,기조망솔명현하강,화기타조비교구유현저성차이(P<0.01);Western blot현시2-g/ml TGF-β1가승고Bcl-xL적표체,Bd-xL/GAPDH(1.06±0.15)재6 h체도고봉,화기타시간점비교구유현저성차이(P<0.01혹P<0.05).결론 TGF-β1대SOD유도적MSCs적조망구유억제작용,기항조망작용가능시통과촉진Bcl-xL표체실현적.
