CAJ | 학술논문

目的: 在传统基因芯片技术基础上, 应用生物传感器技术, 研制一种能将基因芯片信号原位放大后达肉眼判读灵敏度, 无需专用基因芯片检测仪器就可使用, 易于在基层医疗单位推广的薄膜生物传感器基因芯片诊断系统.方法:在薄膜生物传感器基片基础上, 经过表面化学处理, 使特定的基因捕获探针在传感器表面固定, 形成特定检测目的生物传感器基因芯片. 并以乙肝病毒YMDD区的特异序列设计为例, 通过特定的YMDD区的捕获探针, 以矩阵的形式点样于传感器芯片表面来实现本系统. 同时, 纳米金标记的检测探针取代了传统芯片中的荧光标记探针. 扩增后的目的PCR片段与捕获探针、生物素标记探针、链亲蛋白纳米金探针进行反应, 最后得到探针-生物素-链亲蛋白-纳米金复合物, 并在芯片表面经生物传感器芯片将信号原位放大, 获得肉眼观的芯片信号并进行分析, 完成芯片诊断. 以乙型肝炎病毒YMDD突变为例, 观察该芯片系统对临床诊断标本诊断的可靠性.结果: 基因芯片的检测信号经生物传感器原位放大后能肉眼判读或借助普通数码照像机或计算机扫描, 根据信号出现的特定位置即可确定突变的类型. 且该生物传感器基因芯片系统信噪比高, 在人工合成的寡核苷酸及临床血清的检测中, 均可实现生物芯片阴阳性信号完全的有或无的判读; 临床血清标本检测证实, 使用该传感器芯片系统对前期经过测序确定为YMDD突变的23份临床血清结果与测序结果完全一致. 结论:薄膜生物传感器基因芯片集纳米材料、生物传感器技术及原位放大技术为一体, 实现了信号的肉眼判读, 具有通用性高, 准确可靠, 无需大型设备, 易于在基层医疗单位推广使用.
목적: 재전통기인심편기술기출상, 응용생물전감기기술, 연제일충능장기인심편신호원위방대후체육안판독령민도, 무수전용기인심편검측의기취가사용, 역우재기층의료단위추엄적박막생물전감기기인심편진단계통.방법:재박막생물전감기기편기출상, 경과표면화학처리, 사특정적기인포획탐침재전감기표면고정, 형성특정검측목적생물전감기기인심편. 병이을간병독YMDD구적특이서렬설계위례, 통과특정적YMDD구적포획탐침, 이구진적형식점양우전감기심편표면래실현본계통. 동시, 납미금표기적검측탐침취대료전통심편중적형광표기탐침. 확증후적목적PCR편단여포획탐침、생물소표기탐침、련친단백납미금탐침진행반응, 최후득도탐침-생물소-련친단백-납미금복합물, 병재심편표면경생물전감기심편장신호원위방대, 획득육안관적심편신호병진행분석, 완성심편진단. 이을형간염병독YMDD돌변위례, 관찰해심편계통대림상진단표본진단적가고성.결과: 기인심편적검측신호경생물전감기원위방대후능육안판독혹차조보통수마조상궤혹계산궤소묘, 근거신호출현적특정위치즉가학정돌변적류형. 차해생물전감기기인심편계통신조비고, 재인공합성적과핵감산급림상혈청적검측중, 균가실현생물심편음양성신호완전적유혹무적판독; 림상혈청표본검측증실, 사용해전감기심편계통대전기경과측서학정위YMDD돌변적23빈림상혈청결과여측서결과완전일치. 결론:박막생물전감기기인심편집납미재료、생물전감기기술급원위방대기술위일체, 실현료신호적육안판독, 구유통용성고, 준학가고, 무수대형설비, 역우재기층의료단위추엄사용.