环境昆虫学报
環境昆蟲學報
배경곤충학보
JOURNAL OF ENVIRONMENTAL ENTOMOLOGY
2009年
1期
41-45
,共5页
王春苗%钟雪萍%刘攀峰%黎路林
王春苗%鐘雪萍%劉攀峰%黎路林
왕춘묘%종설평%류반봉%려로림
sf9细胞%cDNA文库%草地贪夜蛾%酵母双杂交%昆虫细胞系
sf9細胞%cDNA文庫%草地貪夜蛾%酵母雙雜交%昆蟲細胞繫
sf9세포%cDNA문고%초지탐야아%효모쌍잡교%곤충세포계
草地贪夜蛾Spdoptera frugiperda是危害玉米、高粱等农作物的重要害虫.草地贪夜蛾卵巢细胞系IPLB-Sf-9(Sf9)广泛应用于病毒学研究和真核生物基因表达.本研究从Sf9细胞中提取总RNA,应用SMARTTM技术,构建以pGADT7-Rec为载体的sf9细胞酵母GAL4 AD融合cDNA文库.sf9细胞总RNA的电泳谱型与哺乳动物总RNA存在差异,其28S rRNA带弱于18S rRNA带,所合成的原始ds cDNA大小为0.1-4 kb.文库展现良好的多态性,载体质粒插入的cDNA片段大小大部分在0.3-2 kb之间.Sf9细胞酵母GAL4 AD融合cDNA文库的构建为草地贪夜蛾功能基因的识别和鉴定,为研究杆状病毒与宿主细胞的互作机制提供了重要研究工具.
草地貪夜蛾Spdoptera frugiperda是危害玉米、高粱等農作物的重要害蟲.草地貪夜蛾卵巢細胞繫IPLB-Sf-9(Sf9)廣汎應用于病毒學研究和真覈生物基因錶達.本研究從Sf9細胞中提取總RNA,應用SMARTTM技術,構建以pGADT7-Rec為載體的sf9細胞酵母GAL4 AD融閤cDNA文庫.sf9細胞總RNA的電泳譜型與哺乳動物總RNA存在差異,其28S rRNA帶弱于18S rRNA帶,所閤成的原始ds cDNA大小為0.1-4 kb.文庫展現良好的多態性,載體質粒插入的cDNA片段大小大部分在0.3-2 kb之間.Sf9細胞酵母GAL4 AD融閤cDNA文庫的構建為草地貪夜蛾功能基因的識彆和鑒定,為研究桿狀病毒與宿主細胞的互作機製提供瞭重要研究工具.
초지탐야아Spdoptera frugiperda시위해옥미、고량등농작물적중요해충.초지탐야아란소세포계IPLB-Sf-9(Sf9)엄범응용우병독학연구화진핵생물기인표체.본연구종Sf9세포중제취총RNA,응용SMARTTM기술,구건이pGADT7-Rec위재체적sf9세포효모GAL4 AD융합cDNA문고.sf9세포총RNA적전영보형여포유동물총RNA존재차이,기28S rRNA대약우18S rRNA대,소합성적원시ds cDNA대소위0.1-4 kb.문고전현량호적다태성,재체질립삽입적cDNA편단대소대부분재0.3-2 kb지간.Sf9세포효모GAL4 AD융합cDNA문고적구건위초지탐야아공능기인적식별화감정,위연구간상병독여숙주세포적호작궤제제공료중요연구공구.