中山大学学报（医学科学版）
中山大學學報（醫學科學版）
중산대학학보（의학과학판）
JOURNAL OF SUN YAT-SEN UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCES)
2010年
6期
755-760
,共6页
EB病毒%EB病毒核抗原1%RNA干扰%鼻咽癌
EB病毒%EB病毒覈抗原1%RNA榦擾%鼻嚥癌
EB병독%EB병독핵항원1%RNA간우%비인암
[目的]利用RNA干扰技术抑制C666-1细胞中EB病毒核抗原1(EBNA1)的表达,探索氧化应激与抗氧化相关基因的表达变化.[方法]采用蛋白质印迹证实了能有效抑制EBNA1表达的干扰序列,使用甲基噻唑基四唑(MYT)方法检测C666-1细胞的存活率,利用实时定量PCR芯片技术探索了氧化应激与抗氧化相关基因的转录谱变化,并通过反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质印迹进行了验证.[结果]EBNA1-1414和EBNA1-1437干扰序列转染C666-1细胞48 h后,分别可抑制59%和56%的EBNA1蛋白表达,细胞存活率分别降低了33%和24%.PCR芯片实验发现干扰EBNA1表达后48 h C666一l细胞中花生四烯酸盐12-脂氧合酶(ALOXl2)蛋白表达有下调,谷胱甘肽还原酶(GSR)和过氧化物酶3(PRDX3)在转录水平表达上调.[结论]EBNA1或许能够通过上调ALOX12的表达间接地发挥促鼻咽癌作用.
[目的]利用RNA榦擾技術抑製C666-1細胞中EB病毒覈抗原1(EBNA1)的錶達,探索氧化應激與抗氧化相關基因的錶達變化.[方法]採用蛋白質印跡證實瞭能有效抑製EBNA1錶達的榦擾序列,使用甲基噻唑基四唑(MYT)方法檢測C666-1細胞的存活率,利用實時定量PCR芯片技術探索瞭氧化應激與抗氧化相關基因的轉錄譜變化,併通過反轉錄聚閤酶鏈反應(RT-PCR)和蛋白質印跡進行瞭驗證.[結果]EBNA1-1414和EBNA1-1437榦擾序列轉染C666-1細胞48 h後,分彆可抑製59%和56%的EBNA1蛋白錶達,細胞存活率分彆降低瞭33%和24%.PCR芯片實驗髮現榦擾EBNA1錶達後48 h C666一l細胞中花生四烯痠鹽12-脂氧閤酶(ALOXl2)蛋白錶達有下調,穀胱甘肽還原酶(GSR)和過氧化物酶3(PRDX3)在轉錄水平錶達上調.[結論]EBNA1或許能夠通過上調ALOX12的錶達間接地髮揮促鼻嚥癌作用.
[목적]이용RNA간우기술억제C666-1세포중EB병독핵항원1(EBNA1)적표체,탐색양화응격여항양화상관기인적표체변화.[방법]채용단백질인적증실료능유효억제EBNA1표체적간우서렬,사용갑기새서기사서(MYT)방법검측C666-1세포적존활솔,이용실시정량PCR심편기술탐색료양화응격여항양화상관기인적전록보변화,병통과반전록취합매련반응(RT-PCR)화단백질인적진행료험증.[결과]EBNA1-1414화EBNA1-1437간우서렬전염C666-1세포48 h후,분별가억제59%화56%적EBNA1단백표체,세포존활솔분별강저료33%화24%.PCR심편실험발현간우EBNA1표체후48 h C666일l세포중화생사희산염12-지양합매(ALOXl2)단백표체유하조,곡광감태환원매(GSR)화과양화물매3(PRDX3)재전록수평표체상조.[결론]EBNA1혹허능구통과상조ALOX12적표체간접지발휘촉비인암작용.
