中国药理学通报
中國藥理學通報
중국약이학통보
CHINESE PHARMACOLOGICAL BULLETIN
2011年
3期
378-382
,共5页
HI44a%CD44%HL-60细胞%GM-CSFRα%TGFβ1%OPN
HI44a%CD44%HL-60細胞%GM-CSFRα%TGFβ1%OPN
HI44a%CD44%HL-60세포%GM-CSFRα%TGFβ1%OPN
目的 探讨CD44抗体HI44a对急性髓系白血病细胞株HL-60细胞增殖、分化的作用机制.方法 以急性髓系白血病细胞株HL-60为研究对象,以ATRA为阳性对照,以同型抗体IgG2a为阴性对照,以HI44a作为实验组,应用台盼蓝拒染法检测HI44a对HL-60细胞增殖的影响,瑞氏染色法及流式细胞学检测HI44a对HL-60细胞分化的影响,RT-PCR方法检测HI44a处理HL-60细胞前后TGFβ1和TGFβR1基因表达变化,应用荧光定量RT-PCR法检测HI44a处理HL-60细胞前后髓系分化相关的细胞因子及受体信号通路(GM-CSFRα、OPN)基因表达变化,以及DNA序列分析法检测HI44a处理HL-60细胞前后OPN异构体表达改变.采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测实验组与对照组培养上清液的OPN水平.结果 经HI44a作用后,HL-60细胞增殖受抑;细胞形态变化表现为体积变大,核固缩,核浆比例降低,核仁减少,出现核分叶等特征;细胞表面分化抗原CD15表达上调;HL-60细胞的GM-CSFRα及TGFβ1 mRNA表达水平增高,而OPN mRNA表达水平降低,TGFβR1 mRNA表达水平无变化;OPN序列分析结果表明HI44a作用后OPN的3种异构体的组成发生改变,HI44a处理后的OPN水平明显下降.结论 CD44抗体HI44a通过上调GM-CSFRα、TGFβ1及下调OPN mRNA表达水平,减少OPN的分泌,抑制HL-60细胞增殖,诱导细胞分化.
目的 探討CD44抗體HI44a對急性髓繫白血病細胞株HL-60細胞增殖、分化的作用機製.方法 以急性髓繫白血病細胞株HL-60為研究對象,以ATRA為暘性對照,以同型抗體IgG2a為陰性對照,以HI44a作為實驗組,應用檯盼藍拒染法檢測HI44a對HL-60細胞增殖的影響,瑞氏染色法及流式細胞學檢測HI44a對HL-60細胞分化的影響,RT-PCR方法檢測HI44a處理HL-60細胞前後TGFβ1和TGFβR1基因錶達變化,應用熒光定量RT-PCR法檢測HI44a處理HL-60細胞前後髓繫分化相關的細胞因子及受體信號通路(GM-CSFRα、OPN)基因錶達變化,以及DNA序列分析法檢測HI44a處理HL-60細胞前後OPN異構體錶達改變.採用酶聯免疫吸附試驗(ELISA)檢測實驗組與對照組培養上清液的OPN水平.結果 經HI44a作用後,HL-60細胞增殖受抑;細胞形態變化錶現為體積變大,覈固縮,覈漿比例降低,覈仁減少,齣現覈分葉等特徵;細胞錶麵分化抗原CD15錶達上調;HL-60細胞的GM-CSFRα及TGFβ1 mRNA錶達水平增高,而OPN mRNA錶達水平降低,TGFβR1 mRNA錶達水平無變化;OPN序列分析結果錶明HI44a作用後OPN的3種異構體的組成髮生改變,HI44a處理後的OPN水平明顯下降.結論 CD44抗體HI44a通過上調GM-CSFRα、TGFβ1及下調OPN mRNA錶達水平,減少OPN的分泌,抑製HL-60細胞增殖,誘導細胞分化.
목적 탐토CD44항체HI44a대급성수계백혈병세포주HL-60세포증식、분화적작용궤제.방법 이급성수계백혈병세포주HL-60위연구대상,이ATRA위양성대조,이동형항체IgG2a위음성대조,이HI44a작위실험조,응용태반람거염법검측HI44a대HL-60세포증식적영향,서씨염색법급류식세포학검측HI44a대HL-60세포분화적영향,RT-PCR방법검측HI44a처리HL-60세포전후TGFβ1화TGFβR1기인표체변화,응용형광정량RT-PCR법검측HI44a처리HL-60세포전후수계분화상관적세포인자급수체신호통로(GM-CSFRα、OPN)기인표체변화,이급DNA서렬분석법검측HI44a처리HL-60세포전후OPN이구체표체개변.채용매련면역흡부시험(ELISA)검측실험조여대조조배양상청액적OPN수평.결과 경HI44a작용후,HL-60세포증식수억;세포형태변화표현위체적변대,핵고축,핵장비례강저,핵인감소,출현핵분협등특정;세포표면분화항원CD15표체상조;HL-60세포적GM-CSFRα급TGFβ1 mRNA표체수평증고,이OPN mRNA표체수평강저,TGFβR1 mRNA표체수평무변화;OPN서렬분석결과표명HI44a작용후OPN적3충이구체적조성발생개변,HI44a처리후적OPN수평명현하강.결론 CD44항체HI44a통과상조GM-CSFRα、TGFβ1급하조OPN mRNA표체수평,감소OPN적분비,억제HL-60세포증식,유도세포분화.
