CAJ | 학술논문

目的:孤儿核受体NR4A1是核受体超家族中的一员,其广泛分布于不同的细胞类型并参与多种生物学过程的调控.探讨在卵泡膜细胞中NR4A1对甾体激素生成酶的转录及雄激素生成的影响.方法:构建小鼠NR4A1重组腺病毒载体AdCMV-NR4A1及AdH1-NR4A1,重组病毒感染卵泡24h后,蛋白质印迹(Western Blot)验证NR4A1在卵泡膜细胞中的超表达及干涉效果.实时定量反转录聚合酶链反应(Real-time RT-PCR)检测Nr4al超表达及干涉后对雄激素生成酶(Star.Cypllal,Cyp17al,Hsd3b2)的转录调节,放射免疫法测定培养液中睾酮的浓度结果:AdCMV-NR4A1感染卵泡膜细胞后NR4A1蛋白的表达水平显著升高.NR4A1在卵泡膜细胞内超表达后明显促进Star,Cyp11al,Cyp17a1,Hsd3b2的转录,增加睾酮合成.相反,AdH1-NR4A1感染卵泡膜细胞后,NR4A1蛋白的表达水平显著降低.NR4A1干涉后明显抑制Star,Cypllal,Cyp17a1,Hsd3b2的表达,降低睾酮的合成.此外,在卵泡培养液中加入cAMP/PKA通路激动剂--福斯高林后,Nr4a1的表达迅速增加,随后Star,Cyp11a1,Cyp17a1.Hsd3b2的表达增加.结论:核受体NR4A1在卵泡膜细胞内促进雄激素生成酶的转录,进而调节雄激素生成.该研究为进一步探讨NR4A1在多囊卵巢综合征高雄激素血症等病理生理改变中的分子调控机制奠定了基础.
목적:고인핵수체NR4A1시핵수체초가족중적일원,기엄범분포우불동적세포류형병삼여다충생물학과정적조공.탐토재란포막세포중NR4A1대치체격소생성매적전록급웅격소생성적영향.방법:구건소서NR4A1중조선병독재체AdCMV-NR4A1급AdH1-NR4A1,중조병독감염란포24h후,단백질인적(Western Blot)험증NR4A1재란포막세포중적초표체급간섭효과.실시정량반전록취합매련반응(Real-time RT-PCR)검측Nr4al초표체급간섭후대웅격소생성매(Star.Cypllal,Cyp17al,Hsd3b2)적전록조절,방사면역법측정배양액중고동적농도결과:AdCMV-NR4A1감염란포막세포후NR4A1단백적표체수평현저승고.NR4A1재란포막세포내초표체후명현촉진Star,Cyp11al,Cyp17a1,Hsd3b2적전록,증가고동합성.상반,AdH1-NR4A1감염란포막세포후,NR4A1단백적표체수평현저강저.NR4A1간섭후명현억제Star,Cypllal,Cyp17a1,Hsd3b2적표체,강저고동적합성.차외,재란포배양액중가입cAMP/PKA통로격동제--복사고림후,Nr4a1적표체신속증가,수후Star,Cyp11a1,Cyp17a1.Hsd3b2적표체증가.결론:핵수체NR4A1재란포막세포내촉진웅격소생성매적전록,진이조절웅격소생성.해연구위진일보탐토NR4A1재다낭란소종합정고웅격소혈증등병리생리개변중적분자조공궤제전정료기출.