CAJ | 학술논문

[目的]对缺失α1螺旋的Cry1Ac在大肠杆菌中的表达、纯化和活性进行分析.[方法]以苏云金芽孢杆菌HD-1中的质粒为模板,扩增缺乏α螺旋的Cry1Ac基因,并将其与pET28a载体连接,构建重组质粒.重组质粒转化并经IPTG诱导后,用SDS-PAGE检测目的蛋白的表达.提取目标蛋白,并涂在棉铃虫饲料表面,检测其杀虫活性.[结果] Cry1Acdelα1基因在大肠杆菌中能正常表达目标蛋白,但该目标蛋白是以包涵体形式存在.生侧结果显示,在相同浓度下,活化的Cry1Ac对棉铃虫的致死率达75％以上,而Cry1Acdelα1只有10％左右.[结论]用大肠杆菌表达的Cry1Acdelα1对棉铃虫基本没有杀虫活性.
[목적]대결실α1라선적Cry1Ac재대장간균중적표체、순화화활성진행분석.[방법]이소운금아포간균HD-1중적질립위모판,확증결핍α라선적Cry1Ac기인,병장기여pET28a재체련접,구건중조질립.중조질립전화병경IPTG유도후,용SDS-PAGE검측목적단백적표체.제취목표단백,병도재면령충사료표면,검측기살충활성.[결과] Cry1Acdelα1기인재대장간균중능정상표체목표단백,단해목표단백시이포함체형식존재.생측결과현시,재상동농도하,활화적Cry1Ac대면령충적치사솔체75％이상,이Cry1Acdelα1지유10％좌우.[결론]용대장간균표체적Cry1Acdelα1대면령충기본몰유살충활성.