中国中西医结合外科杂志
中國中西醫結閤外科雜誌
중국중서의결합외과잡지
CHINESE JOURNAL OF SURGERY OF INTEGRATED TRADITIONAL AND WESTERN MEDICINE
2012年
3期
269-272
,共4页
贾岩峰%崔云峰%崔乃强%彭雁飞%宁召臣%张琚
賈巖峰%崔雲峰%崔迺彊%彭雁飛%寧召臣%張琚
가암봉%최운봉%최내강%팽안비%저소신%장거
SCP2基因%白蛋白启动子%腺病毒载体%胆固醇结石
SCP2基因%白蛋白啟動子%腺病毒載體%膽固醇結石
SCP2기인%백단백계동자%선병독재체%담고순결석
目的:构建携带白蛋白启动子SCP2 基因腺病毒载体,研究其与胆固醇结石形成的关系.方法:(1)利用RT-PCR技术克隆小鼠SCP2基因,在其上游接入白蛋白(ALB)启动子,下游连接绿色荧光报告基因(EGFP),构建穿梭质粒pDC312-ALB-SCP2-IRES2-EGFP;(2)采用Ad Max TM Adenoviru5 Vector系统包装病毒,CsCl法纯化病毒、TCID50法测定滴度;(3)重组腺病毒感染小鼠hepa-1-6细胞,实时定量PCR检测mRNA的表达;Western印迹检测SCP2蛋白表达情况;结果:成功构建携带白蛋白启动子SCP2基因腺病毒载体;当SCP2基因过表达时,CYP7a1基因表达下调,(t=3.97,P＜ 0.05)HMGCR基因基因表达上调,(t=3.23,P＜ 0.05).结论:当SCP2基因过表达时引起HMGCR、CYP7a1基因转录水平的变化,提示SCP2基因可能通过影响胆固醇和胆汁酸的代谢而参与胆固醇结石的形成.
目的:構建攜帶白蛋白啟動子SCP2 基因腺病毒載體,研究其與膽固醇結石形成的關繫.方法:(1)利用RT-PCR技術剋隆小鼠SCP2基因,在其上遊接入白蛋白(ALB)啟動子,下遊連接綠色熒光報告基因(EGFP),構建穿梭質粒pDC312-ALB-SCP2-IRES2-EGFP;(2)採用Ad Max TM Adenoviru5 Vector繫統包裝病毒,CsCl法純化病毒、TCID50法測定滴度;(3)重組腺病毒感染小鼠hepa-1-6細胞,實時定量PCR檢測mRNA的錶達;Western印跡檢測SCP2蛋白錶達情況;結果:成功構建攜帶白蛋白啟動子SCP2基因腺病毒載體;噹SCP2基因過錶達時,CYP7a1基因錶達下調,(t=3.97,P＜ 0.05)HMGCR基因基因錶達上調,(t=3.23,P＜ 0.05).結論:噹SCP2基因過錶達時引起HMGCR、CYP7a1基因轉錄水平的變化,提示SCP2基因可能通過影響膽固醇和膽汁痠的代謝而參與膽固醇結石的形成.
목적:구건휴대백단백계동자SCP2 기인선병독재체,연구기여담고순결석형성적관계.방법:(1)이용RT-PCR기술극륭소서SCP2기인,재기상유접입백단백(ALB)계동자,하유련접록색형광보고기인(EGFP),구건천사질립pDC312-ALB-SCP2-IRES2-EGFP;(2)채용Ad Max TM Adenoviru5 Vector계통포장병독,CsCl법순화병독、TCID50법측정적도;(3)중조선병독감염소서hepa-1-6세포,실시정량PCR검측mRNA적표체;Western인적검측SCP2단백표체정황;결과:성공구건휴대백단백계동자SCP2기인선병독재체;당SCP2기인과표체시,CYP7a1기인표체하조,(t=3.97,P＜ 0.05)HMGCR기인기인표체상조,(t=3.23,P＜ 0.05).결론:당SCP2기인과표체시인기HMGCR、CYP7a1기인전록수평적변화,제시SCP2기인가능통과영향담고순화담즙산적대사이삼여담고순결석적형성.
