中国生物工程杂志
中國生物工程雜誌
중국생물공정잡지
JOURNAL OF CHINESE BIOTECHNOLOGY
2004年
12期
74-77,83
,共5页
李国才%孙怀昌%朱秋菊%张泉%居杏珠%陈刚%薛方明%于可响
李國纔%孫懷昌%硃鞦菊%張泉%居杏珠%陳剛%薛方明%于可響
리국재%손부창%주추국%장천%거행주%진강%설방명%우가향
hLYZ cDNA 乳腺特异表达载体 暂态表达
hLYZ cDNA 乳腺特異錶達載體 暫態錶達
hLYZ cDNA 유선특이표체재체 잠태표체
为了比较不同来源乳腺特异表达载体的表达特性,将人溶菌酶(hLYZ)cDNA分别克隆入自行构建的p205C3载体和国外引进的pBJ41和pBC1载体.重组载体p205C3LYZ、pBJLYZ和pBCLYZ分别用25kDa PEI包裹后,通过尾静脉途径注射哺乳期小鼠.注射后72h采集乳样,经微球菌溶解实验证明,3组小鼠乳汁中hLYZ的表达量分别为87、69、60mg/L;从每组小鼠的12种组织提取总RNA,经Dot blotting检测证明,三种重组载体除在乳腺中表达外,p205C3LYZ还在小鼠的脾和肠、pBJLYZ在脾、pBCLYZ在脾和肾中具有一定的异位表达;在有hLYZ mRNA转录的上述脏器中用微球菌溶解试验均可检测到hLYZ活性.这些实验结果表明,自行构建的乳腺特异表达载体的表达特性与从国外引进的表达载体无明显差别.
為瞭比較不同來源乳腺特異錶達載體的錶達特性,將人溶菌酶(hLYZ)cDNA分彆剋隆入自行構建的p205C3載體和國外引進的pBJ41和pBC1載體.重組載體p205C3LYZ、pBJLYZ和pBCLYZ分彆用25kDa PEI包裹後,通過尾靜脈途徑註射哺乳期小鼠.註射後72h採集乳樣,經微毬菌溶解實驗證明,3組小鼠乳汁中hLYZ的錶達量分彆為87、69、60mg/L;從每組小鼠的12種組織提取總RNA,經Dot blotting檢測證明,三種重組載體除在乳腺中錶達外,p205C3LYZ還在小鼠的脾和腸、pBJLYZ在脾、pBCLYZ在脾和腎中具有一定的異位錶達;在有hLYZ mRNA轉錄的上述髒器中用微毬菌溶解試驗均可檢測到hLYZ活性.這些實驗結果錶明,自行構建的乳腺特異錶達載體的錶達特性與從國外引進的錶達載體無明顯差彆.
위료비교불동래원유선특이표체재체적표체특성,장인용균매(hLYZ)cDNA분별극륭입자행구건적p205C3재체화국외인진적pBJ41화pBC1재체.중조재체p205C3LYZ、pBJLYZ화pBCLYZ분별용25kDa PEI포과후,통과미정맥도경주사포유기소서.주사후72h채집유양,경미구균용해실험증명,3조소서유즙중hLYZ적표체량분별위87、69、60mg/L;종매조소서적12충조직제취총RNA,경Dot blotting검측증명,삼충중조재체제재유선중표체외,p205C3LYZ환재소서적비화장、pBJLYZ재비、pBCLYZ재비화신중구유일정적이위표체;재유hLYZ mRNA전록적상술장기중용미구균용해시험균가검측도hLYZ활성.저사실험결과표명,자행구건적유선특이표체재체적표체특성여종국외인진적표체재체무명현차별.
