肿瘤防治杂志
腫瘤防治雜誌
종류방치잡지
CHINA JOURNAL OF CANCER PREVENTION AND TREATMENT
2005年
3期
161-166
,共6页
蔡晓坤%林菊生%刘址忠%谢娜%梁扩寰
蔡曉坤%林菊生%劉阯忠%謝娜%樑擴寰
채효곤%림국생%류지충%사나%량확환
肝肿瘤/遗传学%甲胎蛋白类%基因表达%遗传载体%基因疗法
肝腫瘤/遺傳學%甲胎蛋白類%基因錶達%遺傳載體%基因療法
간종류/유전학%갑태단백류%기인표체%유전재체%기인요법
目的:分别构建甲胎蛋白(α-fetoprotein,AFP)启动子AF 0.3和AFP杂合启动子[HRE]AF调控的PNP基因表达载体,检测并分析两者的表达差异性.方法: 将AF 0.3和[HRE]AF启动子插入载体pcDNA 3.0中,构建肝癌特异表达载体pAF 0.3和p[HRE]AF;将PNP基因分别插入pAF 0.3和p[HRE]AF中,构建两启动子调控的PNP基因表达载体;通过酶切、PCR及测序鉴定各重组体.用脂质体介导法将两重组体转染不同细胞株,RT-PCR检测PNP基因在各细胞株中表达,分析两者表达的特点.结果: 两目的片段均正确插入相应载体,pAF 0.3/PNP中的PNP基因在AFP阳性肝癌细胞中实现了靶向性表达,而p[HRE]AF/PNP中的PNP基因则在AFP阳性和阴性肝癌细胞中实现了靶向性表达.结论: 两种PNP基因表达载体是肝癌基因治疗中新型、高效、特异性的治疗载体.两者的成功构建为利用PNP/Mep-dR系统进行肝癌的靶向性基因治疗奠定了坚实的基础.
目的:分彆構建甲胎蛋白(α-fetoprotein,AFP)啟動子AF 0.3和AFP雜閤啟動子[HRE]AF調控的PNP基因錶達載體,檢測併分析兩者的錶達差異性.方法: 將AF 0.3和[HRE]AF啟動子插入載體pcDNA 3.0中,構建肝癌特異錶達載體pAF 0.3和p[HRE]AF;將PNP基因分彆插入pAF 0.3和p[HRE]AF中,構建兩啟動子調控的PNP基因錶達載體;通過酶切、PCR及測序鑒定各重組體.用脂質體介導法將兩重組體轉染不同細胞株,RT-PCR檢測PNP基因在各細胞株中錶達,分析兩者錶達的特點.結果: 兩目的片段均正確插入相應載體,pAF 0.3/PNP中的PNP基因在AFP暘性肝癌細胞中實現瞭靶嚮性錶達,而p[HRE]AF/PNP中的PNP基因則在AFP暘性和陰性肝癌細胞中實現瞭靶嚮性錶達.結論: 兩種PNP基因錶達載體是肝癌基因治療中新型、高效、特異性的治療載體.兩者的成功構建為利用PNP/Mep-dR繫統進行肝癌的靶嚮性基因治療奠定瞭堅實的基礎.
목적:분별구건갑태단백(α-fetoprotein,AFP)계동자AF 0.3화AFP잡합계동자[HRE]AF조공적PNP기인표체재체,검측병분석량자적표체차이성.방법: 장AF 0.3화[HRE]AF계동자삽입재체pcDNA 3.0중,구건간암특이표체재체pAF 0.3화p[HRE]AF;장PNP기인분별삽입pAF 0.3화p[HRE]AF중,구건량계동자조공적PNP기인표체재체;통과매절、PCR급측서감정각중조체.용지질체개도법장량중조체전염불동세포주,RT-PCR검측PNP기인재각세포주중표체,분석량자표체적특점.결과: 량목적편단균정학삽입상응재체,pAF 0.3/PNP중적PNP기인재AFP양성간암세포중실현료파향성표체,이p[HRE]AF/PNP중적PNP기인칙재AFP양성화음성간암세포중실현료파향성표체.결론: 량충PNP기인표체재체시간암기인치료중신형、고효、특이성적치료재체.량자적성공구건위이용PNP/Mep-dR계통진행간암적파향성기인치료전정료견실적기출.
