中国呼吸与危重监护杂志
中國呼吸與危重鑑護雜誌
중국호흡여위중감호잡지
CHINESE JOURANL OF RESPIRATORY AND CRITICAL CARE MEDICINE
2008年
3期
214-217,插3
,共5页
内皮抑素%腺病毒%基因转染%小鼠%碱性成纤维细胞生长因子
內皮抑素%腺病毒%基因轉染%小鼠%堿性成纖維細胞生長因子
내피억소%선병독%기인전염%소서%감성성섬유세포생장인자
目的 测定携带小鼠内皮抑素(mES)基因的腺病毒(Ad-mES)在肿瘤细胞中的表达,观察mES对体外培养的血管内皮细胞的抑制作用.方法 分别以0.01、0.1、1、10及100共5个不同感染复数(MOI)的Ad-mES转染Lewis肺癌细胞株(LLC).采用免疫组织化学法及Western blot检测Ad-mES转染LLC 48 h后mES蛋白的表达;应用四甲基偶氮唑蓝比色(MTT)分析法测定不同MOI值Ad-mES转染上清对基础状态下及经碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)刺激的人脐静脉内皮细胞(ECV304)的增殖抑制作用.结果 Ad-mES转染LLC 48 h后,LLC细胞浆内可见棕黄色mES阳性表达颗粒,培养上清可表达位于相对分子质量20 000的mES阳性条带,而未转染对照组呈阴性.随转染Ad-mES MOI值的增高,培养上清基础条件下及经bFGF刺激的内皮细胞的抑制作用越显著(与基础条件下比较,P＜0.05).结论 构建的Ad-mES转染LLC后能够表达分泌mES;表达分泌于培养上清中的mES对血管内皮细胞(尤其是bFGF刺激)具有明显的增殖抑制作用.
目的 測定攜帶小鼠內皮抑素(mES)基因的腺病毒(Ad-mES)在腫瘤細胞中的錶達,觀察mES對體外培養的血管內皮細胞的抑製作用.方法 分彆以0.01、0.1、1、10及100共5箇不同感染複數(MOI)的Ad-mES轉染Lewis肺癌細胞株(LLC).採用免疫組織化學法及Western blot檢測Ad-mES轉染LLC 48 h後mES蛋白的錶達;應用四甲基偶氮唑藍比色(MTT)分析法測定不同MOI值Ad-mES轉染上清對基礎狀態下及經堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)刺激的人臍靜脈內皮細胞(ECV304)的增殖抑製作用.結果 Ad-mES轉染LLC 48 h後,LLC細胞漿內可見棕黃色mES暘性錶達顆粒,培養上清可錶達位于相對分子質量20 000的mES暘性條帶,而未轉染對照組呈陰性.隨轉染Ad-mES MOI值的增高,培養上清基礎條件下及經bFGF刺激的內皮細胞的抑製作用越顯著(與基礎條件下比較,P＜0.05).結論 構建的Ad-mES轉染LLC後能夠錶達分泌mES;錶達分泌于培養上清中的mES對血管內皮細胞(尤其是bFGF刺激)具有明顯的增殖抑製作用.
목적 측정휴대소서내피억소(mES)기인적선병독(Ad-mES)재종류세포중적표체,관찰mES대체외배양적혈관내피세포적억제작용.방법 분별이0.01、0.1、1、10급100공5개불동감염복수(MOI)적Ad-mES전염Lewis폐암세포주(LLC).채용면역조직화학법급Western blot검측Ad-mES전염LLC 48 h후mES단백적표체;응용사갑기우담서람비색(MTT)분석법측정불동MOI치Ad-mES전염상청대기출상태하급경감성성섬유세포생장인자(bFGF)자격적인제정맥내피세포(ECV304)적증식억제작용.결과 Ad-mES전염LLC 48 h후,LLC세포장내가견종황색mES양성표체과립,배양상청가표체위우상대분자질량20 000적mES양성조대,이미전염대조조정음성.수전염Ad-mES MOI치적증고,배양상청기출조건하급경bFGF자격적내피세포적억제작용월현저(여기출조건하비교,P＜0.05).결론 구건적Ad-mES전염LLC후능구표체분비mES;표체분비우배양상청중적mES대혈관내피세포(우기시bFGF자격)구유명현적증식억제작용.
