中国兽医学报
中國獸醫學報
중국수의학보
CHINESE JOURNAL OF VETERINARY SCIENCE
2009年
6期
691-695
,共5页
田浪%王红宁%鲁丹%张云飞%王霆%康润敏
田浪%王紅寧%魯丹%張雲飛%王霆%康潤敏
전랑%왕홍저%로단%장운비%왕정%강윤민
传染性支气管炎病毒%抗原表位%嵌合基因%真核表达
傳染性支氣管炎病毒%抗原錶位%嵌閤基因%真覈錶達
전염성지기관염병독%항원표위%감합기인%진핵표체
通过文献报道和计算机软件分析筛选出鸡传染性支气管炎病毒(IBV)结构蛋白基因S1、S2、N基因的T、B细胞的优势抗原表位共7段,采用人工合成及PCR方法将各抗原表位以柔性氨基酸(GP/GA)作为接头串联成一条全新的多表位嵌合基因F,并定向克隆入真核表达质粒pVAX1,采用酶切分析与序列测定方法筛选鉴定阳性重组质粒.阳性质粒pVAX-F通过脂质体转染COS-7细胞进行表达研究.提取转染细胞总RNA,RT-PCR方法检测到目的基因的转录;间接免疫荧光试验(IFA)检测到特异性荧光存在.表明表达产物能与相应抗体特异性结合,证明了具有一定的生物学活性和抗原性,有望成为抗IBV的核酸疫苗.
通過文獻報道和計算機軟件分析篩選齣鷄傳染性支氣管炎病毒(IBV)結構蛋白基因S1、S2、N基因的T、B細胞的優勢抗原錶位共7段,採用人工閤成及PCR方法將各抗原錶位以柔性氨基痠(GP/GA)作為接頭串聯成一條全新的多錶位嵌閤基因F,併定嚮剋隆入真覈錶達質粒pVAX1,採用酶切分析與序列測定方法篩選鑒定暘性重組質粒.暘性質粒pVAX-F通過脂質體轉染COS-7細胞進行錶達研究.提取轉染細胞總RNA,RT-PCR方法檢測到目的基因的轉錄;間接免疫熒光試驗(IFA)檢測到特異性熒光存在.錶明錶達產物能與相應抗體特異性結閤,證明瞭具有一定的生物學活性和抗原性,有望成為抗IBV的覈痠疫苗.
통과문헌보도화계산궤연건분석사선출계전염성지기관염병독(IBV)결구단백기인S1、S2、N기인적T、B세포적우세항원표위공7단,채용인공합성급PCR방법장각항원표위이유성안기산(GP/GA)작위접두천련성일조전신적다표위감합기인F,병정향극륭입진핵표체질립pVAX1,채용매절분석여서렬측정방법사선감정양성중조질립.양성질립pVAX-F통과지질체전염COS-7세포진행표체연구.제취전염세포총RNA,RT-PCR방법검측도목적기인적전록;간접면역형광시험(IFA)검측도특이성형광존재.표명표체산물능여상응항체특이성결합,증명료구유일정적생물학활성화항원성,유망성위항IBV적핵산역묘.
