中国农学通报
中國農學通報
중국농학통보
CHINESE AGRICULTURAL SCIENCE BULLETIN
2009年
22期
79-82
,共4页
卢从德%王代钢%杨金宏%禚苏
盧從德%王代鋼%楊金宏%禚囌
로종덕%왕대강%양금굉%작소
同源重组%大肠杆菌%双链RNA%RNaseⅢ基因
同源重組%大腸桿菌%雙鏈RNA%RNaseⅢ基因
동원중조%대장간균%쌍련RNA%RNaseⅢ기인
为了寻找一种简洁、高效的dsRNA获得方式,降低RNAi技术的生产应用成本.应用PKD46介导的重组系统,将PKD46转入大肠杆菌BL21菌株体内,在L-阿拉伯糖的诱导下,产生重组蛋白,使宿主菌具有同源重组的能力,应用两端具有RNaseⅢ基因40 bp同源序列的PCR产物对其染色体上的RNoseⅢ基因进行了基因敲除,并在具有卡那霉素的LB平板上筛选到重组菌株.获得了一株能够利用IPTG诱导高效合成dsRNA的BL21 RNaseⅢ-菌株,为进一步降低RNAi技术的生产应用成本奠定了基础.
為瞭尋找一種簡潔、高效的dsRNA穫得方式,降低RNAi技術的生產應用成本.應用PKD46介導的重組繫統,將PKD46轉入大腸桿菌BL21菌株體內,在L-阿拉伯糖的誘導下,產生重組蛋白,使宿主菌具有同源重組的能力,應用兩耑具有RNaseⅢ基因40 bp同源序列的PCR產物對其染色體上的RNoseⅢ基因進行瞭基因敲除,併在具有卡那黴素的LB平闆上篩選到重組菌株.穫得瞭一株能夠利用IPTG誘導高效閤成dsRNA的BL21 RNaseⅢ-菌株,為進一步降低RNAi技術的生產應用成本奠定瞭基礎.
위료심조일충간길、고효적dsRNA획득방식,강저RNAi기술적생산응용성본.응용PKD46개도적중조계통,장PKD46전입대장간균BL21균주체내,재L-아랍백당적유도하,산생중조단백,사숙주균구유동원중조적능력,응용량단구유RNaseⅢ기인40 bp동원서렬적PCR산물대기염색체상적RNoseⅢ기인진행료기인고제,병재구유잡나매소적LB평판상사선도중조균주.획득료일주능구이용IPTG유도고효합성dsRNA적BL21 RNaseⅢ-균주,위진일보강저RNAi기술적생산응용성본전정료기출.
