国际眼科杂志
國際眼科雜誌
국제안과잡지
INTERNATIONAL JOURNAL OF OPHTHALMOLOGY
2011年
5期
769-771
,共3页
汤明芳%于健%白浪%刘琼
湯明芳%于健%白浪%劉瓊
탕명방%우건%백랑%류경
重组腺相关病毒%基因%转染%角膜基质细胞%增殖
重組腺相關病毒%基因%轉染%角膜基質細胞%增殖
중조선상관병독%기인%전염%각막기질세포%증식
目的:评价8型重组腺相关病毒(rAAV8)介导增强型绿色荧光蛋白基因(EGFP)转染角膜基质细胞后的表达及对细胞增殖的影响.方法:以不同MOI的rAAV8-EGFP转染大鼠角膜基质细胞,转染后以倒置荧光显微镜观察角膜基质细胞中GFP的表达,流式细胞仪分析角膜基质细胞中rAAV8-EGFP表达的阳性率.MTT法分别检测rAAV8和rAAV8-EGFP转染对角膜基质细胞增殖的影响.结果:倒置荧光显微镜观察rAAV8-EGFP转染角膜基质细胞后GFP的阳性表达7d达到高峰,此时流式细胞仪检测rAAV8-EGFP对角膜基质细胞的转染效率分别为31.5%(MOI=5×103),42.5%(MOI=5×104),54.8%(MOI=5×105);MTT检测结果显示rAAV8及rAAV8-EGFP转染对角膜基质细胞增殖均无明显影响.结论:rAAV8-EGFP能有效地转染角膜基质细胞,并且对细胞增殖无明显影响.
目的:評價8型重組腺相關病毒(rAAV8)介導增彊型綠色熒光蛋白基因(EGFP)轉染角膜基質細胞後的錶達及對細胞增殖的影響.方法:以不同MOI的rAAV8-EGFP轉染大鼠角膜基質細胞,轉染後以倒置熒光顯微鏡觀察角膜基質細胞中GFP的錶達,流式細胞儀分析角膜基質細胞中rAAV8-EGFP錶達的暘性率.MTT法分彆檢測rAAV8和rAAV8-EGFP轉染對角膜基質細胞增殖的影響.結果:倒置熒光顯微鏡觀察rAAV8-EGFP轉染角膜基質細胞後GFP的暘性錶達7d達到高峰,此時流式細胞儀檢測rAAV8-EGFP對角膜基質細胞的轉染效率分彆為31.5%(MOI=5×103),42.5%(MOI=5×104),54.8%(MOI=5×105);MTT檢測結果顯示rAAV8及rAAV8-EGFP轉染對角膜基質細胞增殖均無明顯影響.結論:rAAV8-EGFP能有效地轉染角膜基質細胞,併且對細胞增殖無明顯影響.
목적:평개8형중조선상관병독(rAAV8)개도증강형록색형광단백기인(EGFP)전염각막기질세포후적표체급대세포증식적영향.방법:이불동MOI적rAAV8-EGFP전염대서각막기질세포,전염후이도치형광현미경관찰각막기질세포중GFP적표체,류식세포의분석각막기질세포중rAAV8-EGFP표체적양성솔.MTT법분별검측rAAV8화rAAV8-EGFP전염대각막기질세포증식적영향.결과:도치형광현미경관찰rAAV8-EGFP전염각막기질세포후GFP적양성표체7d체도고봉,차시류식세포의검측rAAV8-EGFP대각막기질세포적전염효솔분별위31.5%(MOI=5×103),42.5%(MOI=5×104),54.8%(MOI=5×105);MTT검측결과현시rAAV8급rAAV8-EGFP전염대각막기질세포증식균무명현영향.결론:rAAV8-EGFP능유효지전염각막기질세포,병차대세포증식무명현영향.