CAJ | 학술논문

目的:探讨龟版有效成分对无血清培养所致的表皮干细胞(epidermal stem cell,ESC)凋亡的药效作用和可能机制.方法:分离培养孕龄2周的Sprague-Dawley胎鼠背部皮肤制备ESC,分为正常组、模型对照组和龟版有效成分各组.采用含龟版有效成分的无血清达尔伯克改良伊格尔培养基培养24、48和72 h后,用3-（4,5-二甲基噻唑-2）-2,5---苯基四氮唑溴盐（3-（4,5-dimethyhhiazol-2-yl）-2,5-diphenyltetrazolium bromide,MTT)法检测ESC的活力,筛选药物最佳作用时间；ESC用各药物培养48 h后,异硫氰酸荧光素标记的膜联蛋白V和碘化丙锭双标后用流式细胞仪检测细胞凋亡率,蛋白质印迹法检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3 (caspase-3)和Bcl-2蛋白的表达水平.结果:MTT检测结果表明,在24、48和72 h时各有效成分组ESC活力较模型对照组增强(P＜0.01),且作用48 h时乙酸乙酯部位提取物组ESC活力高于十八酸乙酯、十四酸甾醇酯、4-甾酮各组(P＜0.05,P＜0.01).作用48 h时,乙酸乙酯部位提取物抗凋亡效果最强,4-甾酮抗凋亡效果最弱.蛋白免疫印迹结果表明,乙酸乙酯部位提取物、十八酸乙酯、十四酸甾醇酯、4-甾酮均能显著上调Bcl-2和下调caspase-3的表达,有抗凋亡作用.结论:乙酸乙酯部位提取物有较强的抗ESC凋亡作用,优于它的各组分单独作用,调控Bcl-2与caspase-3之间的表达平衡可能是其抗ESC凋亡的机制之一.
목적:탐토구판유효성분대무혈청배양소치적표피간세포(epidermal stem cell,ESC)조망적약효작용화가능궤제.방법:분리배양잉령2주적Sprague-Dawley태서배부피부제비ESC,분위정상조、모형대조조화구판유효성분각조.채용함구판유효성분적무혈청체이백극개량이격이배양기배양24、48화72 h후,용3-（4,5-이갑기새서-2）-2,5---분기사담서추염（3-（4,5-dimethyhhiazol-2-yl）-2,5-diphenyltetrazolium bromide,MTT)법검측ESC적활력,사선약물최가작용시간；ESC용각약물배양48 h후,이류청산형광소표기적막련단백V화전화병정쌍표후용류식세포의검측세포조망솔,단백질인적법검측반광안산천동안산단백매3 (caspase-3)화Bcl-2단백적표체수평.결과:MTT검측결과표명,재24、48화72 h시각유효성분조ESC활력교모형대조조증강(P＜0.01),차작용48 h시을산을지부위제취물조ESC활력고우십팔산을지、십사산치순지、4-치동각조(P＜0.05,P＜0.01).작용48 h시,을산을지부위제취물항조망효과최강,4-치동항조망효과최약.단백면역인적결과표명,을산을지부위제취물、십팔산을지、십사산치순지、4-치동균능현저상조Bcl-2화하조caspase-3적표체,유항조망작용.결론:을산을지부위제취물유교강적항ESC조망작용,우우타적각조분단독작용,조공Bcl-2여caspase-3지간적표체평형가능시기항ESC조망적궤제지일.