吉林农业大学学报
吉林農業大學學報
길임농업대학학보
JOURNAL OF JILIN AGRICUL TURAL UNIVERSITY
2012年
1期
104-108
,共5页
马亮%刁玉梅%任保彦%官鹏涛%李建华%张西臣
馬亮%刁玉梅%任保彥%官鵬濤%李建華%張西臣
마량%조옥매%임보언%관붕도%리건화%장서신
刚地弓形虫%SAG3基因%原核表达
剛地弓形蟲%SAG3基因%原覈錶達
강지궁형충%SAG3기인%원핵표체
根据GenBank中弓形虫表面抗原SAG3基因序列,以弓形虫总RNA反转录的cDNA为模板,扩增出SAG3去除信号肽基因并进行原核表达.将重组pET-28a(+ )-SAG3阳性表达质粒转入大肠杆菌BL(DE3)中,用IPTG进行诱导表达.通过SDS- PAGE和Western blotting对重组蛋白进行分析和鉴定.结果表明:成功扩增了不合信号肽的SAG3基因,构建的原核表达质粒在大肠杆菌中得到了高效表达,能够与鼠抗弓形虫阳性血清发生特异性反应,去信号肽的SAG蛋白具有反应原性.
根據GenBank中弓形蟲錶麵抗原SAG3基因序列,以弓形蟲總RNA反轉錄的cDNA為模闆,擴增齣SAG3去除信號肽基因併進行原覈錶達.將重組pET-28a(+ )-SAG3暘性錶達質粒轉入大腸桿菌BL(DE3)中,用IPTG進行誘導錶達.通過SDS- PAGE和Western blotting對重組蛋白進行分析和鑒定.結果錶明:成功擴增瞭不閤信號肽的SAG3基因,構建的原覈錶達質粒在大腸桿菌中得到瞭高效錶達,能夠與鼠抗弓形蟲暘性血清髮生特異性反應,去信號肽的SAG蛋白具有反應原性.
근거GenBank중궁형충표면항원SAG3기인서렬,이궁형충총RNA반전록적cDNA위모판,확증출SAG3거제신호태기인병진행원핵표체.장중조pET-28a(+ )-SAG3양성표체질립전입대장간균BL(DE3)중,용IPTG진행유도표체.통과SDS- PAGE화Western blotting대중조단백진행분석화감정.결과표명:성공확증료불합신호태적SAG3기인,구건적원핵표체질립재대장간균중득도료고효표체,능구여서항궁형충양성혈청발생특이성반응,거신호태적SAG단백구유반응원성.
