实用儿科临床杂志
實用兒科臨床雜誌
실용인과림상잡지
Journal of Applied Clinical Pediatrics
2011年
10期
745-748
,共4页
叶亮英%顾绍庆%郑意%李继安%朱广丽%顾小海
葉亮英%顧紹慶%鄭意%李繼安%硃廣麗%顧小海
협량영%고소경%정의%리계안%주엄려%고소해
人巨细胞病毒%低分子质量肝素%更昔洛韦%细胞病变效应
人巨細胞病毒%低分子質量肝素%更昔洛韋%細胞病變效應
인거세포병독%저분자질량간소%경석락위%세포병변효응
目的 研究低分子质量肝素(LMWH)联合更昔洛韦(GCV)体外抗人巨细胞病毒(HCMV)感染的作用.方法 采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法测定LMWH联合GCV对人胚肺成纤维细胞(HELF)的最大无毒质量浓度(TC0).应用体外细胞培养技术建立HCMV-AD169感染HELF模型.固定联合药物中LMWH的TC0(625.00 mg·L-1),设LWMH 625.00 mg·L-1、GCV 35.00 mg·L-1、GCV 17.50 mg·L-1、GCV 8.75 mg·L-1、LMWH 625.00 mg·L-1+ GCV 35.00 mg·L-1、LMWH 625.00 mg·L-1+ GCV 17.50 mg·L-1、LMWH 625.00 mg·L-1+ GCV 8.75 mg·L-1 7个不同用药组,分别干预HCMV感染细胞模型,使用MTT法检测各组细胞存活率,观察感染细胞特征性细胞病变(CPE),同时应用荧光定量PCR法检测用药后各组HCMV的载量.结果 联合药物的TC0中GCV的质量浓度为375.00 mg·L-1,LMWH的质量浓度为625.00 mg·L-1.当HCMV AD169浓度为100倍半数组织培养感染量(TCID50)感染HELF时,LMWH和GCV均可提高受染细胞存活率,降低受染细胞的HCMV DNA的拷贝数;当固定LMWH的TC0,与3种不同质量浓度GCV配伍时,均在HELF上有明显的抗HCMV的生物活性,并显示配伍后的抑制作用明显大于对应质量浓度单用GCV的抑制作用(P<0.01);当联合用药中GCV剂量减半时与全量应用GCV时的抗HCMV效果相同[即GCV 35.00 mg·L-1组与联合用药LMWH 625.00 mg·L-1+GCV 17.50 mg·L-1组的病毒抑制率和DNA拷贝数比较差异无统计学意义(P>0 05)];且联合用药对细胞的毒性试验结果及显微镜下观察细胞形态变化显示,随着联合用药中二者药物质量浓度的下降,细胞存活率升高,对细胞的毒性作用减弱.结论 LMWH联合GCV具有良好的体外抗HCMV作用,二者具有协同抗病毒作用.
目的 研究低分子質量肝素(LMWH)聯閤更昔洛韋(GCV)體外抗人巨細胞病毒(HCMV)感染的作用.方法 採用四甲基偶氮唑鹽(MTT)比色法測定LMWH聯閤GCV對人胚肺成纖維細胞(HELF)的最大無毒質量濃度(TC0).應用體外細胞培養技術建立HCMV-AD169感染HELF模型.固定聯閤藥物中LMWH的TC0(625.00 mg·L-1),設LWMH 625.00 mg·L-1、GCV 35.00 mg·L-1、GCV 17.50 mg·L-1、GCV 8.75 mg·L-1、LMWH 625.00 mg·L-1+ GCV 35.00 mg·L-1、LMWH 625.00 mg·L-1+ GCV 17.50 mg·L-1、LMWH 625.00 mg·L-1+ GCV 8.75 mg·L-1 7箇不同用藥組,分彆榦預HCMV感染細胞模型,使用MTT法檢測各組細胞存活率,觀察感染細胞特徵性細胞病變(CPE),同時應用熒光定量PCR法檢測用藥後各組HCMV的載量.結果 聯閤藥物的TC0中GCV的質量濃度為375.00 mg·L-1,LMWH的質量濃度為625.00 mg·L-1.噹HCMV AD169濃度為100倍半數組織培養感染量(TCID50)感染HELF時,LMWH和GCV均可提高受染細胞存活率,降低受染細胞的HCMV DNA的拷貝數;噹固定LMWH的TC0,與3種不同質量濃度GCV配伍時,均在HELF上有明顯的抗HCMV的生物活性,併顯示配伍後的抑製作用明顯大于對應質量濃度單用GCV的抑製作用(P<0.01);噹聯閤用藥中GCV劑量減半時與全量應用GCV時的抗HCMV效果相同[即GCV 35.00 mg·L-1組與聯閤用藥LMWH 625.00 mg·L-1+GCV 17.50 mg·L-1組的病毒抑製率和DNA拷貝數比較差異無統計學意義(P>0 05)];且聯閤用藥對細胞的毒性試驗結果及顯微鏡下觀察細胞形態變化顯示,隨著聯閤用藥中二者藥物質量濃度的下降,細胞存活率升高,對細胞的毒性作用減弱.結論 LMWH聯閤GCV具有良好的體外抗HCMV作用,二者具有協同抗病毒作用.
목적 연구저분자질량간소(LMWH)연합경석락위(GCV)체외항인거세포병독(HCMV)감염적작용.방법 채용사갑기우담서염(MTT)비색법측정LMWH연합GCV대인배폐성섬유세포(HELF)적최대무독질량농도(TC0).응용체외세포배양기술건립HCMV-AD169감염HELF모형.고정연합약물중LMWH적TC0(625.00 mg·L-1),설LWMH 625.00 mg·L-1、GCV 35.00 mg·L-1、GCV 17.50 mg·L-1、GCV 8.75 mg·L-1、LMWH 625.00 mg·L-1+ GCV 35.00 mg·L-1、LMWH 625.00 mg·L-1+ GCV 17.50 mg·L-1、LMWH 625.00 mg·L-1+ GCV 8.75 mg·L-1 7개불동용약조,분별간예HCMV감염세포모형,사용MTT법검측각조세포존활솔,관찰감염세포특정성세포병변(CPE),동시응용형광정량PCR법검측용약후각조HCMV적재량.결과 연합약물적TC0중GCV적질량농도위375.00 mg·L-1,LMWH적질량농도위625.00 mg·L-1.당HCMV AD169농도위100배반수조직배양감염량(TCID50)감염HELF시,LMWH화GCV균가제고수염세포존활솔,강저수염세포적HCMV DNA적고패수;당고정LMWH적TC0,여3충불동질량농도GCV배오시,균재HELF상유명현적항HCMV적생물활성,병현시배오후적억제작용명현대우대응질량농도단용GCV적억제작용(P<0.01);당연합용약중GCV제량감반시여전량응용GCV시적항HCMV효과상동[즉GCV 35.00 mg·L-1조여연합용약LMWH 625.00 mg·L-1+GCV 17.50 mg·L-1조적병독억제솔화DNA고패수비교차이무통계학의의(P>0 05)];차연합용약대세포적독성시험결과급현미경하관찰세포형태변화현시,수착연합용약중이자약물질량농도적하강,세포존활솔승고,대세포적독성작용감약.결론 LMWH연합GCV구유량호적체외항HCMV작용,이자구유협동항병독작용.
